[发明专利]煤制油废水COD降解用菌种驯化试剂盒及驯化方法

说明书

技术领域：

本发明属于一种菌种驯化试剂盒及驯化方法，特别涉及一种用于降解煤制油废水COD用菌种的驯化试剂盒及驯化方法。

背景技术：

煤制油是以煤炭为原料，通过化学加工过程生产油品和石油化工产品的一项技术，包含煤直接液化和煤间接液化两种技术路线。我国煤贮量占世界总贮量的36％，占我国能源总量的70％以上，因此在我国，煤制油是燃料化工的主导。

煤制油生产过程中产生的含油废水的特点是：多环芳烃和苯系物及其衍生物、酚、硫等有毒物质浓度高，可生化性差，是一种比较难处理的废水。综合废水中COD根据污水处理工艺不同一般在1000-5000mg/L左右。含油废水的危害主要表现在：油类物质形成的薄膜漂浮在水面上，空气中的氧就不能溶解于水中，水中的溶解氧就会减少，致使水体中浮游生物等因缺氧而死亡，水生植物的光合作用也受到限制，从而水体的自净作用将会受到影响，水质也会变臭，水资源的利用价值也会遭到破坏，而且油中一些低沸点芳香烃化合物的存在会导致人类癌症的发生，从而影响人体健康。

目前国内处理煤制油废水的主要工艺路线基本遵行“预处理+生化处理+深度处理”，其中生化处理是污水处理工艺的重要阶段。通过对国内多个煤制油企业的实地走访，目前对于预处理后的煤制油废水，一般采用缺氧、好氧生物法处理(A/O工艺)。微生物是废水生物处理过程的核心，制约着污水处理的效果。在污水厂启动初期或运行受到冲击需要重新恢复运行时，国内普遍采用的方法是向污水处理设施中投加污泥和营养物质，或者投加市场上现有的专用微生物菌剂，达到污水处理设施正常运行的目的。对于煤制油废水的处理，投加污泥和菌剂的效果受到以下几方面问题的制约：一、煤制油废水中含有多种对微生物有毒害作用的物质，投加到污水中的污泥或菌种中的部分微生物容易被废水中的毒性物质所抑制，为解决此问题往往需要对污泥或菌种在投加前进行长时间的驯化；二、煤制油废水中有大量油类等难降解有机物，这些物质很难被微生物利用并降解，解决这个问题通常需要工艺的合理设计与污泥或菌剂的驯化共同解决；三、与普通污水相比，煤制油废水处理设施的启动时间更长，需要更长时间的驯化。

发明内容：

本发明的目的在于解决以上问题，提供一种菌种驯化试剂盒及驯化方法，经本试剂盒驯化后的菌种投放到煤制油废水中，可以大大缩短污水处理启动时间，提高COD降解效率。该驯化培养基具有较广的适用性，通过其驯化后的菌种投入到多个煤制油污水样品后，其COD降解能力均有所提高。该试剂盒可以模拟缺氧、好氧生物法工艺，可以应用于煤制油污水处理菌剂的产品优化，以及污水厂在运行前对污泥进行快速驯化。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的：一种煤制油废水COD降解用菌种驯化试剂盒，其特征在于：它是由富集管、驯化预制管A、驯化预制管B组成；其中：

(一)、富集管：

富集管的制备：

(1)、取牛肉膏0.7-1.0g，蛋白胨0.7-1.0g，磷酸二氢钾1.2-2.0g，磷酸氢二钠1.5-2.5g，用1L水溶解，以上培养基用浓度5％的碳酸钠和5％HCl调pH至7.00-7.50，分装到50ml螺口管中，每支管加入培养基20ml；分装完毕后，将螺口管盖拧松，115℃灭菌25-30min，待灭菌结束并冷却至室温后，从灭菌锅中取出并拧紧管盖，至此基础富集管制备完成；

(2)、取苯酚10-13mg，萘酚2-4mg，喹啉1-2mg，甲醇0.08-0.12ml，丁醇0.08-0.12ml，用100ml无菌水溶解，溶解后在无菌条件下用0.22μm无菌滤膜过滤除菌；过滤除菌完成后，取2ml经过过滤除菌的溶液，0.2-0.3μl煤制柴油，在无菌条件下加入到步骤(1)中的基础富集管中，在高速漩涡震荡器上震荡5-10min，至此富集管制备完成；

(二)、驯化预制管A：

驯化预制管A的制备：

(1)、取牛肉膏0.4-0.7g，蛋白胨0.4-0.7g，丙三醇0.4-0.6ml，磷酸二氢钾1.2-2.0g，磷酸氢二钠1.5-2.5g，用1L水溶解，以上培养基用浓度5％的碳酸钠和5％HCl调pH至7.50-8.00，分装到50ml螺口管中，每支管加入培养基30ml；分装完毕后，将螺口管盖拧松，115℃灭菌25-30min，待灭菌结束并冷却至室温后，从灭菌锅中取出并拧紧管盖，至此基础驯化预制管A制备完成；