[发明专利]大孔吸附树脂分离纯化辣蓼黄酮的工艺

权利要求书

1.一种大孔吸附树脂分离纯化辣蓼黄酮的工艺，其特征在于包括以下步骤：

(1)利用超声-酶解偶联法对辣蓼药材进行总黄酮的提取；

(2)将步骤(1)获得的提取液依次经过石油醚、氯仿、乙酸乙酯以及正丁醇萃取，收集乙酸乙酯部分和正丁醇部分的黄酮，减压蒸干备用；

(3)将步骤(2)获得的乙酸乙酯部分和正丁醇部分的黄酮配制成浓度为0.5～1.5mg/mL的上柱液，通过预处理好的大孔吸附树脂，用60～80％乙醇洗脱4～10倍量柱体积，洗脱液进行蒸发浓缩，真空干燥，即得纯化辣蓼总黄酮；

步骤(1)按以下操作进行：

⑴将辣蓼药材干燥、粉碎，分别加入重量为辣蓼药材重量0.2～0.4％的果胶酶和纤维素酶，混合均匀，加入pH值为4.8的HAc-NaAc缓冲液，进行超声-酶解；

⑵用Na₂CO₃溶液调节超声-酶解后的溶液pH值为9.0，80～90℃水浴10～20min使酶失活；

⑶加入乙醇浸提24h，过滤收集浸提液，滤渣再加入乙醇溶液重复浸提一次，过滤，合并两次浸提液。

2.根据权利要求1所述的大孔吸附树脂分离纯化辣蓼黄酮的工艺，其特征在于所述预处理按以下操作进行：取大孔吸附树脂用无水乙醇浸泡24h充分溶胀之后装柱，用95％乙醇冲洗,收集洗脱液，检查洗脱液无浑浊即可停止收集洗脱液，然后用去离子水洗脱，除去乙醇；用4倍量柱体积的3％盐酸溶液冲洗，去离子水冲洗至中性；用4倍量柱体积的3％氢氧化钠溶液冲洗，去离子水冲洗至中性即可。

3.根据权利要求1所述的大孔吸附树脂分离纯化辣蓼黄酮的工艺，其特征在于：所述大孔吸附树脂为弱极性或极性的大孔吸附树脂。

4.根据权利要求1所述的大孔吸附树脂分离纯化辣蓼黄酮的工艺，其特征在于：所述大孔吸附树脂为D101、AB-8、DM-130或XDA-8型号。

5.根据权利要求4所述的大孔吸附树脂分离纯化辣蓼黄酮的工艺，其特征在于：所述超声-酶解温度为30～60℃，时间为1.0～2.0h。

6.根据权利要求4所述的大孔吸附树脂分离纯化辣蓼黄酮的工艺，其特征在于：所述HAc-NaAc缓冲液与辣蓼药材的体积质量比为5～50mL：1g。

7.根据权利要求4所述的大孔吸附树脂分离纯化辣蓼黄酮的工艺，其特征在于：所述步骤⑶中加入乙醇后，乙醇的终体积浓度为60～80％。