[发明专利]一种高质量薏苡基因组DNA的提取方法在审
申请号: | 201510574684.0 | 申请日: | 2015-09-11 |
公开(公告)号: | CN105087548A | 公开(公告)日: | 2015-11-25 |
发明(设计)人: | 付瑜华;杨成龙;刘凡值;周明强;李志芳;黎青;班秀文;蒙秋伊;敖茂宏;刘鹏飞;王建;罗凯;周祥 | 申请(专利权)人: | 贵州省亚热带作物研究所 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 贵阳中新专利商标事务所 52100 | 代理人: | 李余江;程新敏 |
地址: | 562400 贵州省黔西南*** | 国省代码: | 贵州;52 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 质量 薏苡 基因组 dna 提取 方法 | ||
1.一种高质量薏苡基因组DNA的提取方法,其特征在于:取在液氮中充分研磨的薏苡叶片迅速放入提取液中,混匀后置于水浴中;冷至室温后加入无水乙醇和KAc溶液,涡旋混匀;加入等体积的氯仿/异戊醇混合液抽提,进行低温离心处理;取上清液,加入等体积的氯仿/异戊醇混合液进行第二次抽提,第二次进行离心处理后获得第二次上清液;将二次离心上清液加入CTAB沉淀缓冲液,混匀后室温静置,然后第三次进行离心处理;将沉淀溶于NaCl溶液中加入预冷的无水乙醇,絮状沉淀析出后挑出并用70%乙醇洗涤两次,风干后溶于TE溶液中。
2.根据权利要求1所述的高质量薏苡基因组DNA的提取方法,其特征在于:所述的提取液由如下成分组成:浓度2%CTAB,100mmol/LTris-HCl,1.4mol/LNaCl,20mmol/LEDTA,浓度2%PVP,浓度1%SDS,pH为8.0,提取液使用前加入β-巯基乙醇至终浓度为2%。
3.根据权利要求1所述的薏苡基因组DNA提取方法,其特征在于:所述的CTAB沉淀缓冲液由如下成分组成:浓度1%CTAB,100mmol/LTris-HCl,10mmol/LEDTA,pH为8.0。
4.根据权利要求1所述的薏苡基因组DNA提取方法,其特征在于:所述的TE溶液由如下成分组成:1mmol/LEDTA,10mmol/LTris-HCl,pH为8.0。
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