[发明专利]一种同时测定利格列汀和二甲双胍含量的高效液相色谱法

说明书

技术领域

本发明涉及医药领域，具体涉及一种同时测定利格列汀和二甲双

胍含量的高效液相色谱法。

背景技术

利格列汀，英文名linagliptin，化学名为8-[(3R)-3-氨基-1-哌啶基]-7-(2-丁炔基)-3,7-二氢-3-甲基-1-[(4-甲基-2-喹唑啉基)甲基]-1H-嘌呤-2,6-二酮。利格列汀是由勃林格殷格翰与礼来退出的新型二肽基肽酶抑制剂，用于治疗2-型糖尿病，利格列汀单方制剂于2013年4月在我国上市；盐酸二甲双胍，英文名Metforminhydrochloride，化学名为1,1-二甲基双胍盐酸盐。盐酸二甲双胍片临床使用已有50多年历史，作为最广泛使用的降糖药物之一，用于控制糖尿病及其并发症。

专利CN102596191与CN103391771中将盐酸二甲双胍与利格列汀制成复方制剂，盐酸二甲双胍与利格列汀联合使用治疗2型糖尿病，可以安全、有效地降糖，改善胰岛B细胞功能，不良反应的发生率低。且复方制剂每日1次口服，增加患者依从性，该药上市后前景良好。

美国FDA于2012年1月30日批准利格列汀盐酸二甲双胍片“JENTADUETO”上市，规格为利格列汀2.5mg，二甲双胍500mg、850mg和1000mg，由于2-型糖尿病具有复杂的发病机制，大多数2-型糖尿病患者需要接受一种以上的药物治疗以降低其血糖水平。JENTADUETO获得批准，为那些需要一种以上药物治疗，而且适合接受利格列汀和二甲双胍的患者提供了很好的治疗选择，“JENTADUETO”于2014年12月30日在我国申报生产，近期将上市。

利格列汀与二甲双胍同时测定的含量分析方法尚无文献报道。为了保证该复方制剂研发和生产过程中质量控制的需要，我们通过大量实验，摸索了一套同时检测利格列汀与盐酸二甲双胍的方法，在严格进行了方法验证后，确保该方法科学严谨，能够满足研发及生产中含量控制的需求。

发明内容

本发明的目的在于针对现有技术的不足，现提供一种能够同时测定利格列汀和二甲双胍含量的高效液相色谱法。

为实现上述目的，本发明的技术方案是：一种同时测定利格列汀和二甲双胍含量的高效液相色谱法，其创新点在于：所述色谱条件为：选用以辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂，检测波长225～230nm，柱温35～45℃，流速0.8～1.2ml/min；采用反相高效液相色谱法，所述流动相为添加离子对试剂的缓冲盐溶液与极性有机溶剂，所述添加离子对试剂的缓冲盐溶液为A相，所述极性有机溶剂为B相，所述流动相中A相的离子对试剂为庚烷磺酸钠，缓冲盐为磷酸二氢钾；所述流动相中Ｂ相的有机溶剂为乙腈。

进一步的，所述A相中添加的离子对试剂庚烷磺酸钠的加入量为10～30mmol/L，所述流动相中A相的添加离子对试剂的缓冲盐溶液的pH值为3～4。

本发明另一个目的是公开一种同时测定利格列汀和二甲双胍含量的高效液相色谱法，其创新点在于：所述具体操作步骤如下：

（1）选取利格列汀二甲双胍片10片，所述利格列汀二甲双胍片的规格为2.5/500mg，置与1000ml量瓶中，加入乙腈溶剂，溶解并稀释至刻度线，摇匀，所述乙腈溶剂中乙腈与水的体积比为1:1；

（2）精密量取2mL步骤（1）中所得混合液，放置于100mL容量瓶中，加入乙腈溶剂，溶解并稀释至刻度线，摇匀，作为供试液，所述乙腈溶剂中乙腈与水的体积比为1:1；

（3）另取盐酸二甲双胍2.5mg和利格列汀对照品500mg，加入乙腈溶剂，溶解稀释至刻度，配制成含盐酸二甲双胍0.1mg/ml，含量利格列汀0.5μg/ml的溶液，作为对照液，所述乙腈溶剂中乙腈与水的体积比为1:1；

（4）分别量取供试液及对照溶液10μl，注入色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算并折干，即得。

本发明的有益效果如下：本发明采用了反相高效液相色谱法，通过制备供试液和对照液，并且分别量取供试液及对照溶液10μl，注入色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算并折干，即完成了定利格列汀和二甲双胍含量的测试，填补了目前定利格列汀和二甲双胍含量的测试分析方法尚无的空缺，本发明可以满足研发和生产的需求，为利格列汀药物的早日上市提供了必要的技术支持。

附图说明

图1为本发明实施例1的二甲双胍和利格列汀的色谱图。

图2为本发明实施例2的二甲双胍和利格列汀的色谱图。

图3为本发明实施例3的二甲双胍和利格列汀的色谱图。

具体实施方式