[发明专利]一种检测人类PEAR1基因多态性的试剂盒及其应用在审
| 申请号： | 201510581594.4 | 申请日： | 2015-09-10 |
| 公开（公告）号： | CN105671142A | 公开（公告）日： | 2016-06-15 |
| 发明（设计）人： | 徐运;邵渊;张希根 | 申请（专利权）人： | 南京仁天生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 南京中新达专利代理有限公司 32226 | 代理人： | 孙鸥;朱杰 |
| 地址： | 210000 江苏省*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 检测 人类 pear1 基因 多态性 试剂盒 及其 应用 | ||
1.一种检测人类PEAR1基因多态性的试剂盒，包括盒体和装于盒体内的物质，其特征在 于：所述盒体内的物质包括检测PEAR1基因上的rs2768759号和rs12041331两个SNP位点的 特异性引物及特异性荧光探针、TaqDNA聚合酶、dNTP混合液、MgCl2溶液、荧光定量PCR反应 缓冲液和去离子水；
所述PEAR1基因上的rs2768759号位点特异性引物中的正义引物和反义引物的序列为：
正义引物：5’-CCACCCTCAGCCCTATCACT-3’，
反义引物：5’-AGATTGAATCATGGGAGTGGG-3’；
所述PEAR1基因上的rs12041331号位点特异性荧光探针包括野生型探针和突变性探 针，它们的序列为：
野生型探针：5’-FAM-CACCTGTCCAGTTCC-MGB-3’
突变型探针：5’-HEX-CACCTGTCCCGTTCC-MGB-3’；
所述PEAR1基因上的rs12041331号位点特异性引物中的正义引物和反义引物的序列 为：
正义引物：5’-GGTGAGGGGTTATCCTATGCTAC-3’，
反义引物：5’-GATTAGAGTTCCTGGTGGACAAGA-3’；
所述PEAR1基因上的rs2768759号位点特异性荧光探针包括野生型探针和突变性探针， 它们的序列为：
野生型探针：5’-FAM-TCTCACTTCCATCACC-MGB-3’
突变型探针：5’-HEX-TCTCACTTCCGTCACC-MGB-3’。
2.如权利要求1所述的一种检测人类PEAR1基因多态性的试剂盒，分别检测rs2768759 号和rs12041331两个SNP位点，其特征在于：所述盒体中各物质的含量为：浓度为10μM的特 异性引物共0.45μl，其中正义引物和反义引物各0.225μl；浓度为5μM的特异性荧光探针共 0.2μl，其中野生型探针和突变型探针各0.1μl；浓度为5单位/μl的TaqDNA聚合酶0.02μl； 浓度为20mM的dNTP混合液0.1μl；浓度为25mM的MgCl2溶液0.5μl；5X荧光定量PGR反应缓冲 液2μl；去离子水4.73μl。
3.如权利要求1所述的一种检测人类PEAR1基因多态性的试剂盒，其特征在于：所述检 测rs2768759号位点特异性引物中，正义引物的Tm值为58.4℃，反义引物的Tm值为58.3℃； 所述特异性荧光探针中，野生型探针的Tm值为69℃，突变型探针的Tm值为68℃；所述检测 rs12041331号位点特异性引物中，正义引物的Tm值为58.7℃，反义引物的Tm值为59.1℃；所 述特异性荧光探针中，野生型探针的Tm值为66℃，突变型探针的Tm值为66℃。
4.如权利要求1所述的一种检测人类PEAR1基因多态性的试剂盒，其特征在于：所述试 剂盒的保存温度为-20℃。
5.一种检测人类PEAR1基因多态性的试剂盒的应用，其物征在于：所述试剂盒用于检测 PEAR1基因上rs2768759号和rs12041331两个SNP位点的基因型。
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