[发明专利]一种检测人类前列腺癌特异性基因的环介导等温扩增试剂盒及其应用有效
申请号: | 201510582538.2 | 申请日: | 2015-09-15 |
公开(公告)号: | CN105063230B | 公开(公告)日: | 2019-04-05 |
发明(设计)人: | 贾瑞鹏;谭思嘉;许露伟;徐郑;梁凯;吴然 | 申请(专利权)人: | 贾瑞鹏 |
主分类号: | C12Q1/6886 | 分类号: | C12Q1/6886;C12Q1/6844 |
代理公司: | 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350 | 代理人: | 汤东凤 |
地址: | 210006 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 检测 人类 前列腺癌 特异性 基因 环介导 等温 扩增 试剂盒 及其 应用 | ||
1.一种检测人类前列腺癌特异性基因的环介导等温扩增试剂盒,其特征在于:该试剂盒包括以下试剂:引物、2倍环介导等温扩增反应缓冲液、阳性对照、阴性对照、DNA聚合酶、逆转录酶和显色剂,所述的引物由一对外引物、一对内引物和一组环引物组成,所述的引物序列如下:
外引物F3:ATACAGCACAGCCTCTCC;
外引物B3:GAATCTCATATGTGTCCCTTC;
环引物LB:TTGTTTAGGTGGTATGGGAGG;
内引物FIP:GTCCTGACATGTTCAAGGAATTACATTATCTGTCATCACCATCAACC;
内引物BIP:GCCTGAGAAGCTCTTCCTTGTTGCATGAAGTAAGATAGTCAAC;
所述的DNA聚合酶为具有链置换作用的BstDNA聚合酶,活力为8个活性单位/微升;所述的逆转录酶采用鸟类成髓细胞白血病病毒逆转录酶,活力为10个活性单位/微升;所述的阳性对照为含人前列腺癌特异性基因PCA3的cDNA样本;所述的阴性对照为双蒸水;所述显色剂为钙黄绿素螯合剂。
2.根据权利要求1所述的一种检测人类前列腺癌特异性基因的环介导等温扩增试剂盒,其特征在于:所述的2倍环介导等温扩增反应缓冲液由40mM三羟甲基氨基甲烷盐酸盐、20mM氯化钾、16mM硫酸镁、20mM硫酸铵、1.6mM甜菜碱、2.8mM的脱氧核糖核苷三磷酸和0.2%质量百分浓度的吐温20组成,其中mM是摩尔浓度的单位,指的是每升溶液中所含有溶质的摩尔数。
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