[发明专利]一种从狭叶红景天根中制备红景天苷化学对照品的方法

说明书

本发明涉及一种从狭叶红景天根中制备红景天苷化学对照品的方法，该方法包括以下步骤：⑴硅胶柱色谱富集：狭叶红景天根醇提物经硅胶柱色谱分离、洗脱，并经薄层色谱检测后减压干燥即得棕黄色粉末状的红景天苷粗品；⑵微孔树脂除杂：红景天苷粗品经溶解、微孔树脂柱分离、洗脱、减压干燥，即得红景天苷类组分；⑶反相液相制备色谱精制：红景天苷类组分经溶解、微孔滤膜过滤并采用高效反相液相制备色谱柱进行分离，收集制备色谱图中目标色谱峰馏分，该目标色谱峰馏分经减压干燥即得白色粉末状的红景天苷对照品。本发明工艺简单、易规模化。

技术领域

本发明涉及一种化学对照品的制备方法，尤其涉及一种从狭叶红景天根中制备红景天苷化学对照品的方法。

背景技术

狭叶红景天（Rhodiola kirilowii (Regel) Maxim.）系景天科（Crassulaceae）红景天属（Rhodiola L.）植物。《藏药志》中记载：狭叶红景天根入药，可用于清热退烧、解毒、防瘟、治肺炎、腹泻、四肢肿胀等。现代药理研究发现，狭叶红景天具有预防高原反应、活血化瘀、提高耐缺氧能力、辐射保护、改善心血管系统功能等作用。狭叶红景天在青海省分布较广，资源量大，目前还未被规模化使用。因此，从狭叶红景天根中发展高纯度红景天苷的高效制备方法，对狭叶红景天的规模化开发利用及相关新药的研究具有重要意义。

目前，中国专利（CN101974045A）报道采用微波提取、二次醇沉及大孔树脂纯化等步骤从大花红景天药材中得到纯度约为92%的红景天苷，过程较繁琐、耗时且醇沉过程损失量较大，不适合工业化生产，但从狭叶红景天根中制备红景天苷的文献未见报道。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种工艺简单、易规模化的从狭叶红景天根中制备红景天苷化学对照品的方法。

为解决上述问题，本发明所述的一种从狭叶红景天根中制备红景天苷化学对照品的方法，包括以下步骤：

⑴硅胶柱色谱富集：

狭叶红景天根醇提物经硅胶柱色谱分离，用5~10倍柱体积的氯仿-甲醇-水混合溶剂洗脱，按每份200~500 mL收集馏分，并经薄层色谱检测，其中展开剂为氯仿-甲醇-水混合溶剂，显色剂为体积浓度10%的浓硫酸乙醇溶液，合并Rf值为0.5~0.7的馏分；所述Rf值为0.5~0.7的馏分经减压干燥即得棕黄色粉末状的红景天苷粗品；

⑵微孔树脂除杂：

所述红景天苷粗品用其质量10~20倍的水溶液溶解，过滤得到滤液A，该滤液A上微孔树脂柱分离，并用2~5倍柱体积的体积分数为20~50%的甲醇溶液洗脱，收集洗脱物；所述洗脱物经减压干燥，即得红景天苷类组分；

⑶反相液相制备色谱精制：

所述红景天苷类组分用其质量10~20倍的水溶液溶解，经0.45 μm微孔滤膜过滤，得到滤液B；所述滤液B采用高效反相液相制备色谱柱进行分离，经检测波长为220 nm的紫外检测器检测，收集制备色谱图中目标色谱峰馏分，该目标色谱峰馏分经减压干燥即得白色粉末状的红景天苷对照品。

所述步骤⑴中狭叶红景天根醇提物是指将狭叶红景天根粉碎至50~100目后，按1kg：5~20 L的料液比加入体积分数为95%的乙醇或甲醇，在温度为40℃~95℃、提取次数为1~3次、每次提取时间为1~3h的条件下进行提取，得到提取液，该提取液经过滤得到滤液C；所述滤液C经减压干燥至膏状即得。

所述步骤⑴中氯仿-甲醇-水混合溶剂是指将氯仿、甲醇、水按9：1：0.1~7：3：0.5体积比混合均匀而得。

所述步骤⑴中硅胶是指100~200目的柱层析硅胶。

所述减压干燥的条件均是指真空度为0.06~0.09 MPa，温度为50~70 ℃。