[发明专利]酸枣仁对照提取物及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种酸枣仁对照提取物的制备方法，包括以下步骤：

粉碎：取酸枣仁药材，粉碎，得酸枣仁粗粉；

脱脂：取上述酸枣仁粗粉，置于超临界CO₂萃取装置的萃取釜中，以超临界CO₂萃取去除酸枣仁粗粉中的脂类成分，得药渣；

提取：取上述药渣，按照每克酸枣仁药材6ml-10ml的量加入体积百分浓度为40％-80％乙醇水溶液，加热回流1-4小时，过滤，得滤液；

大孔树脂纯化：将上述滤液浓缩后上样加至大孔吸附树脂柱上，以7-11个柱体积的体积百分浓度为0-10％的乙醇水溶液洗脱，弃去，再以3-5个柱体积的体积百分浓度为50％-70％的乙醇水溶液洗脱，收集洗脱液，回收溶剂，得酸枣仁对照提取物粗品；

硅胶纯化：取上述酸枣仁对照提取物粗品，以体积百分浓度为50％-70％的乙醇水溶液溶解，加入适量硅胶拌样，蒸干溶剂后上样至硅胶柱，先以20-30个柱体积的乙酸乙酯洗脱，弃去，再以40-60个柱体积的体积比为70:30-50:50的乙酸乙酯-甲醇洗脱，收集洗脱液，回收溶剂，得酸枣仁对照提取物。

2.根据权利要求1所述的酸枣仁对照提取物的制备方法，其特征在于，所述脱脂步骤中，采用以下条件进行超临界CO₂萃取：萃取釜温度为40-60℃，压力为25-35Mpa，第一分离釜温度为40-50℃，压力为5.5-6.5Mpa，第二分离釜温度为30-40℃，压力为4-5Mpa，CO₂流量为25-35L/小时，萃取2-4小时。

3.根据权利要求1所述的酸枣仁对照提取物的制备方法，其特征在于，所述大孔树脂纯化的具体步骤为：将上述滤液浓缩后上样加至大孔吸附树脂柱上，以4-6个柱体积的水洗脱，弃去，再以3-5个柱体积的体积百分浓度为10％的乙醇水溶液洗脱，弃去，再以3-5个柱体积的体积百分浓度为50％-70％的乙醇水溶液洗脱，收集洗脱液，回收溶剂，得酸枣仁对照提取物粗品。

4.根据权利要求3所述的酸枣仁对照提取物的制备方法，其特征在于，所述大孔树脂纯化的具体步骤为：将上述滤液浓缩后上样加至D101型大孔吸附树脂柱上，以5个柱体积的水洗脱，弃去，再以4个柱体积的体积百分浓度为10％的乙醇水溶液洗脱，弃去，再以4个柱体积的体积百分浓度为60％的乙醇水溶液洗脱，收集洗脱液，回收溶剂至干，60℃减压干燥12小时，研成细粉，得酸枣仁对照提取物粗品。

5.根据权利要求1所述的酸枣仁对照提取物的制备方法，其特征在于，所述硅胶纯化步骤中，所述硅胶柱中填充的为粒径为300目的正相硅胶，洗脱过程具体为：先以25个柱体积的乙酸乙酯洗脱，弃去，再以17个柱体积的体积比为70:30的乙酸乙酯-甲醇洗脱，收集洗脱液，最后以33个柱体积的体积比为50:50的乙酸乙酯-甲醇洗脱，收集洗脱液，合并两次收集得到的洗脱液，回收溶剂，得酸枣仁对照提取物。

6.根据权利要求5所述的酸枣仁对照提取物的制备方法，其特征在于，所述硅胶纯化步骤中，将加入适量硅胶拌样并蒸干溶剂后的样品均匀填充至胶管中，将该胶管与低压制备液相相连，以该低压制备液相进行洗脱。

7.根据权利要求1所述的酸枣仁对照提取物的制备方法，其特征在于，所述提取的具体步骤为：按照每克酸枣仁药材8ml的量加入体积百分浓度为60％乙醇水溶液，加热回流2次，每次1小时，过滤，合并滤液。

8.一种酸枣仁对照提取物，其特征在于，通过权利要求1-7任一项所述的酸枣仁对照提取物的制备方法制备得到。

9.一种酸枣仁对照提取物的应用，其特征在于，将权利要求8所述的酸枣仁对照提取物用于酸枣仁及含酸枣仁的中药制剂的质量控制中。

10.根据权利要求9所述的酸枣仁对照提取物的应用，其特征在于，所述酸枣仁及含酸枣仁的中药制剂的质量控制方法为：将所述酸枣仁对照提取物、待测样品以薄层色谱法和/或高效液相色谱法进行检测，对比判别；

所述薄层色谱法的检测条件为：

薄层板：硅胶薄层板；

展开剂：水饱和正丁醇；

显色剂及检视：以香草醛硫酸溶液为显色剂检视，和/或置于日光灯下检视，和/或置于365nm的紫外灯下检视；

所述高效液相色谱法包括黄酮类检测和皂苷类检测；

黄酮类检测条件为：

固定相：C₁₈色谱柱；

柱温：20-30℃；

流动相：A相为乙腈，B相为水，按照以下梯度洗脱程序进行：

流速：1.0ml/min；

检测器：二极管阵列检测器；

皂苷类检测条件为：

固定相：C₁₈色谱柱；

柱温：30-40℃；

流动相：A相为乙腈，B相为水，按照以下梯度洗脱程序进行：

流速：1.0ml/min；

检测器：蒸发光散射检测器。