[发明专利]一种羊齿天冬组织培养快速繁殖方法有效
| 申请号： | 201510585962.2 | 申请日： | 2015-09-15 |
| 公开（公告）号： | CN105145359B | 公开（公告）日： | 2017-04-26 |
| 发明（设计）人： | 王晓峰;李刚;李林轩;梁莹;缪剑华 | 申请（专利权）人： | 广西壮族自治区药用植物园 |
| 主分类号： | A01H4/00 | 分类号： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 广西南宁公平知识产权代理有限公司45104 | 代理人： | 黄永校 |
| 地址： | 530023 广西壮*** | 国省代码： | 广西;45 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 羊齿 天冬 组织培养 快速 繁殖 方法 | ||
1.一种羊齿天冬组织培养快速繁殖方法，其特征在于：该方法包括以下步骤：
(1)外植体的选择与消毒：取羊齿天冬健壮植株新萌发的嫩芽作为外植体，依次用2％洗洁精水溶液浸泡5min、线状自来水冲洗15-30min、添加了2-3滴吐温-20的100毫升0.1％升汞消毒8-10min、无菌水冲洗3-5次，然后用消毒滤纸除去表面水分，得到外植体，其中无菌水为经高温高压灭菌的蒸馏水；
(2)外植体初代诱导获得无菌试管苗：将步骤(1)得到的外植体置于超净工作台内，切成长0.5-1.0cm的茎段，接种到MS培养基中，在培养温度为23-27℃，光照强度1500lux，光照时间为8-10h/d的条件下培养30天得到无菌试管苗，其中MS培养基中添加0.5-1.5mg/L的6-苄基腺嘌呤6-BA、0.1-0.5mg/L的萘乙酸NAA、30g/L蔗糖和5g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8；
(3)试管苗丛生芽快速繁殖培养：将步骤(2)中得到的无菌试管苗置于MS繁殖培养基中，在培养温度为23-27℃，光照强度1500lux，光照时间为8-10h/d的条件下培养30天得到试管苗丛生芽，其中MS繁殖培养基中添加0.5-1.5mg/L的6-苄基腺嘌呤6-BA、0.1-0.5mg/L的吲哚丁酸IBA、0.1-0.5mg/L的激动素KT、30g/L蔗糖和5g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8；
(4)丛生芽壮苗培养：将步骤(3)中得到的丛生芽置于MS壮苗培养基中，在培养温度23-27℃，光照强度1500lux，光照时间为8-10h/d的条件下培养30d得到健壮植株，其中MS壮苗培养基中添加0.1-1.0mg/L2，4二氯苯氧乙酸2,4-D 0.5-0.1.5mg/L的6-苄基腺嘌呤6-BA0.1-1.0mg/L的赤霉素GA3、30g/L蔗糖和5g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8；
(5)生根培养：将步骤(4)中得到的健壮植株置于MS生根培养基中，在培养温度为23-27℃，光照强度1500lux，光照时间为8-10h/d的条件下培养30天得到完整带根苗，其中MS生根培养基中添加0.5-4.0mg/L的萘乙酸NAA、的0.5-3.0mg/L的6-苄基腺嘌呤6-BA、10g/L蔗糖和5g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8；
(6)炼苗移栽：将步骤(5)得到的完整带根苗在室温下炼苗4-7天，待表面角质形成后将苗取出，洗净根部培养基，移栽到按质量比为蛭石：泥炭土＝1：1的基质中，生长一个月后移栽到大田。
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