[发明专利]一种免标记荧光探针及其在检测双倍体G‑四链体结构中的应用

权利要求书

1.醚链连接的对称小檗碱二聚体衍生物，其分子结构如式I所示：

（I），其中n为2或3。

2.权利要求1所述的醚链连接的对称小檗碱二聚体衍生物作为G-四链体结构检测探针的应用。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述的G-四链体DNA结构为双倍体G-四链体结构。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：所述的双倍体G-四链体结构为5’-A(GGGTTA)₇G₃-3’或5’-A(GGGTTA)₄(TTAGGG)₄-3’序列构成的双倍体G-四链体结构。

5.权利要求1所述的醚链连接的对称小檗碱二聚体衍生物检测双倍体G-四链体结构的方法，其特征在于：该方法为将待测DNA溶液中加入醚链连接的对称小檗碱二聚体衍生物溶液，混匀，检测混合液的荧光强度，若待测DNA溶液的荧光强度增强了至少160倍，说明待测DNA中含有双倍体G-四链体结构。

6.根据权利标注5所述的方法，其特征在于：所述待测DNA溶液的溶剂为含Na⁺的pH6.0～8.0的Tris-HCl缓冲液。

7.根据权利标注5所述的方法，其特征在于：所述醚链连接的对称小檗碱二聚体衍生物溶液的溶剂为含Na⁺的pH6.0～8.0的Tris-HCl缓冲液。

8.根据权利标注5所述的方法，其特征在于：所述待测DNA与醚链连接的对称小檗碱二聚体衍生物的摩尔比为（1~10）：1。

9.权利要求1所述的醚链连接的对称小檗碱二聚体衍生物检测双倍体G-四链体结构的方法，其特征在于：包括以下步骤：

1）测定待测DNA溶液中DNA的浓度；

2）往待测DNA溶液中加入醚链连接的对称小檗碱二聚体衍生物，混匀，检测混合液的荧光强度；

3）将上步测得的荧光强度和所述衍生物检测双倍体G-四链体结构的标准荧光光谱进行比对，即可判断待测DNA中是否含有双倍体G-四链体结构，并确定具体含有哪种双倍体G-四链体结构。

10.权利要求1所述的醚链连接的对称小檗碱二聚体衍生物检测细胞中G-四链体结构的方法，其特征在于：该方法为将细胞与所述衍生物共孵2.5~3.5h后，在荧光显微镜下对细胞进行荧光检测，若细胞产生明显的荧光，说明细胞中含有G-四链体结构。