[发明专利]鉴定区分普通小麦春化基因VRN3等位基因的特异引物及其应用

权利要求书

1.一种鉴定区分普通小麦春化基因VRN3等位基因的特异引物，其特征在于：包括，

前引物：

58A-F：5'-CCGGTCGATCTACACTAGGAAGA-3'，

67B-F1：5'-CGTACCCTAGCTAGCAAGGCAA-3'，

70D-F2：5'-GCTCCAGAGAACCTCTGCTGC-3'，和

后引物：

JR1：5’-AGAGAAGCCACCGGTCTCATAC-3’。

2.一种鉴定区分普通小麦春化基因VRN3等位基因的方法，其特征在于，包括以下步骤：

以普通小麦品种的基因组DNA为模板，用权利要求1所述前引物和后引物，进行PCR扩增，得到1660bp、1899bp和1687bp片段的扩增产物，即分别为等位基因VRN-A3、VRN-B3、VRN-D3。

3.根据权利要求2所述鉴定区分普通小麦春化基因VRN3等位基因的方法，其特征在于：所述PCR扩增所采用的反应体系为20μL，包括2μL10×缓冲液，0.2μL的5UrTaqDNA聚合酶，1.8μL的2.5μmol·L^-1dNTP，每条引物1μL、浓度10μmol·L^-1，DNA模板1μL，余量为ddH₂O；反应程序为：94℃预变性5min；94℃变性30s，60～62℃退火30s，72℃延伸0.5～1.5min，如此35个循环；72℃终延伸10min。

4.根据权利要求3所述鉴定区分普通小麦春化基因VRN3等位基因的方法，其特征在于：所述前引物58A-F、67B-F1、70D-F2对应的退火温度分别为60.0、61.7、61.5℃。