[发明专利]石龟活性肽精制法及在预防肝硬化、抗疲劳中的应用

说明书

本发明公开了一种石龟活性肽精制法，先采用醋酸浸泡预处理，软化膨胀组织，去除部分杂蛋白，再采用酶解法并加入柠檬酸作为酶解介质，活性肽提取率在25％以上，而现有技术提取率在10％左右，且克服了传统炮制法耗时耗能，一般的酸水解法氨基酸受破坏，碱水解法易发生消旋作用等缺点，此外还结合多级膜分离技术，选择性高、副产物少、适应性强，分离出的活性肽纯度高于75％，分子量小于10KD，可以完整形式进入机体循环系统，易吸收，而常用的离心、沉降过滤法分子量分布不均一，吸收效果差。本发明经过酶解，微滤及多级超滤过程中同时完成了脱盐，脱苦，所制得的石龟活性肽颜色变浅，无异味，分子量趋于均一，安全无毒，在预防肝硬化，抗疲劳，增强免疫力等保健应用前景广阔。

技术领域

本发明涉及生物保健食品技术领域，具体说是石龟活性肽精制法及在预防肝硬化、抗疲劳中的应用。

背景技术

当今社会，生活节奏快，竞争激烈，工作、学习和生活压力大，不少人忙于工作，透支健康，进食不规律，饮食无节制，引起肝、肾系统的紊乱，直接或间接损伤肝肾，免疫力降低，抗病能力下降，在我国，约有15％的人是健康的，15％的人处于非健康，70％的人呈“亚健康”状态。目前“亚健康”人群的规模及严重程度已不容乐观，研究开发出保护肝肾组织、预防肝硬化，抗疲劳，增强免疫力，提高人们的生活质量和身体素质的保健品已是非常迫切。

石龟，即广西拟水龟，又称石金钱龟、越南石龟、广西水龟、黄喉水龟，作为药用首载于汉代《神农本草经》，列为上品，此后本草多有记载，其中《本草求真》言“专入肾，兼入心，甘咸，微寒”，《本草纲目》记载道“(龟)能通任脉，故取其甲以补心、补肾、去瘀血，止血痢，续筋骨，治劳倦，消痈肿”。自古以来，我国就有食龟强身健体的保健功效，现代医学研究表明，龟含有丰富的人体必需氨基酸、蛋白质、角质、骨胶原、Ca、P、K及多种维生素、血糖、脂肪酸等营养成分，人体易吸收，加上龟耐饥、耐渴、耐寒、寿命长的生活习性，构成了其机体多种长寿细胞因子，具有滋阴潜阳，益肾强骨，固经止血，补心安神，可用于肾阴不足，阴虚偏亢，盗汗，遗精等，尤其是针对肝纤维化，抗疲劳等表现出较好的保健功效，还有研究发现石龟活性肽可促进癌症患者在放化疗后体内白细胞生长，恢复身体健康，达到防癌功效。

钦州，地处亚热带沿海区，气候适宜，由于地理自然条件得天独厚，钦州石金钱龟更接近自然生态产品，品质优异，已成为中国地理标志产品，以其独有的营养保健、经济价值成为名优养殖的后起之秀，目前石龟养殖户已过万，年产值超过3.5亿，然而，尽管货源充足，但更多还停留于单一养殖销售模式，已上市的产品种类较少如：鲜活速冻品、罐装食品，且往往工艺粗糙，口感差，缺乏市场竞争力，精深加工仍处于空白状态。如何从石龟中提取、分离纯化出活性肽仍是研究的一大难点，传统的炮制法有效成分煎出需较长时间，能耗大，一般的酸提取法部分氨基酸受破坏，产品得率低，碱水提取法提取出的含有羟基和巯基的氨基酸易发生消旋作用，肽类失活，且肽类的分离纯化是一项系统工程，一般的沉降过滤、离心分离、溶剂萃取是很难达到良好分离效果，故本发明在前期大量实验基础上研制出一种石龟深加工方法，提取率高，分离纯化效果好，活性高，旨在充分利用钦州地方资源优势，对石龟营养、保健价值深入系统研究，形成科研、生产、深加工、销售为一体的完整体系，研制出的石龟活性肽具有较好的预防肝硬化，抗疲劳，增强免疫力保健功效。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供一种简单安全、易操作、产品纯度高的石龟活性肽精制法，还提供了其在预防肝硬化、抗疲劳保健应用，旨在以充分利用地方石龟资源，开发出更多应用前景广阔的深加工保健品。

为实现上述目的，本发明提供了石龟活性肽精制法，包括如下步骤：

1)原料预处理：将石龟处死，去头，剔除内脏，洗涤3-4次，粉碎，调pH 2-3，10℃以下浸泡24h，待膨胀均匀后取出，用水反复清洗2-3次至无酸味，沥干，加水8-10倍打浆，至匀浆液，加水补足失重；