[发明专利]一种检测DNMT3A基因突变的引物与方法在审
申请号: | 201510608008.0 | 申请日: | 2015-09-23 |
公开(公告)号: | CN105200129A | 公开(公告)日: | 2015-12-30 |
发明(设计)人: | 梁耀铭;于世辉;赵薇薇;燕启江;胡昌明 | 申请(专利权)人: | 南宁金域医学检验所有限公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/11 |
代理公司: | 北京精金石专利代理事务所(普通合伙) 11470 | 代理人: | 刘晔 |
地址: | 530007 广西壮族自治区南宁*** | 国省代码: | 广西;45 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 检测 dnmt3a 基因突变 引物 方法 | ||
1.一种检测DNMT3A基因突变的引物,其特征在于,包括针对DNMT3A基因外显子23的上游引物TGTAAAACGACGGCCAGTAGGAGTTGGTGGGTGTGAG和下游引物CAGGAAACAGCTATGACCATGATGTCCAACCCTTTTCG。
2.如权利要求1所述的检测DNMT3A基因突变的引物,其特征在于,所述引物中外显子23的上游引物和外显子23的下游引物浓度比为1:1。
3.一种检测DNMT3A基因突变的方法,其特征在于,包括如下步骤:A)提取DNA样品;B)采用权利要求1或2中所述的引物进行PCR扩增;C)对扩增产物进行凝胶电泳分析后,采用Sanger测序法检测,对检测结果进行分析。
4.如权利要求3所述的检测DNMT3A基因突变的方法,其特征在于,所述步骤A)中的DNA样品为EDTA抗凝外周血或骨髓血的DNA样品。
5.如权利要求3所述的检测DNMT3A基因突变的方法,其特征在于,所述步骤B)中的PCR扩增反应条件包括:阶段1:98℃3min;阶段2:98℃10s;阶段3:63℃30s;阶段4:72℃1min;阶段5:返回到阶段2,34个循环;阶段6:72℃5min;阶段7:25℃保温。
6.如权利要求3所述的检测DNMT3A基因突变的方法,其特征在于:所述步骤C)中,采用Sequencher4.1.4软件对检测结果进行分析。
7.如权利要求1或2所述的检测DNMT3A基因突变的引物在制备检测DNMT3A基因突变试剂中的用途。
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