[发明专利]一种简便、快速测定葡萄花青素的方法

说明书

技术领域

本发明属于分析化学领域，具体涉及一种测定葡萄花青素的方法。

背景技术

葡萄(VitaceaeLindl)在我国栽培历史悠久，至今已有7000年历史。葡萄食用品质包括外观品质和营养品质，外观品质包括葡萄颗粒的大小、葡萄果实颜色、葡萄果实的性状。营养品质包括含糖量、可溶性固形物、可溶性蛋白、花青素等。花青素含量和成分决定了葡萄果实的颜色，同时也决定了葡萄价格和销售量的因素(贺普超.葡萄学[M]1999.8-32；ZoharyDetal.Beginningsoffruitgrowingintheoldworld.Science,1975,187：319-327.)。花青素是一种特殊结构的黄酮类物质，目前在国际上公认的天然抗氧化剂，由于其特殊的保健功能，市场上主要的抗氧化保健品主要以花青素为主要成分。

目前花青素的测定方法有可见分光光度法、HPLC分析法、盐酸/香草醛法。对于葡萄中的花青素的测定方法，传统的分光光度法是KMnO₄分光光度计法，该方法基于花青素结构中含有还原性基因，能够在强酸性介质中与KMnO4发生氧化还原反应，在545nm吸光度值减少而在310nm处吸光度值增加，通过A₃₁₀/A₅₄₅的比值来测定花青素。

发明内容

发明目的：本发明在现有技术的基础上进行了改进，虽然本发明还是利用分光光度计测定花青素的含量，但是在材料处理上较原来的简单。尤其是对于同一种植物不同品种之间的差异能够迅速测定出来。缩短了测定时间，简化测定的步骤。

技术方案：本发明提供了一种测定葡萄花青素的方法，将葡萄的果皮及果肉放入乙醇和浓盐酸的混合液中，葡萄的果皮及果肉总质量与混合液体积的比例为0.05g：10ml；

浸提后利用分光光度计测定溶液中花青素的相对含量。所述的提浸时间小于等于30min。

花青素相对含量的计算公式为：花青素相对含量＝(A₅₃₀-A₆₅₇/4)/M。式中A₅₃₀为在波长530nm的吸光度；A₆₅₇为在波长657nm的吸光度；M为实验取材的质量。花青素在酸性溶液里呈红色，其颜色的深浅与花青素的浓度成正比，花青素酸性溶液的吸收高峰波长是530nm。花青素在657nm处无吸收峰，本发明采用上述公式能够消除基线误差。

上述步骤中所述的乙醇与浓盐酸的体积比为1:99。乙醇浓度为80％；浓盐酸的浓度为37％。本发明采用上述的溶液体系浸提时间短，而且花青素在这种体系下比较稳定，不易降解。操作简便、节能、高效等优点。

有益效果：1、现有技术中采用盐酸甲醇法在材料处理中需要研磨、离心、还有加热。本发明所采用的简化的步骤中省去前面繁琐的操作，直接浸提半小时就能将葡萄中的花青素相对含量测出来。对于葡萄群体品质的比较，此方法较省时。

2、整个测定过程对环境没有污染、安全性高、使用的药品简单、易于购买、节约成本。

3、本发明对材料处理能够节约时间，简化测定花青素含量在省时上要比传统的测定提高40％。

具体实施方式：

实施例1(夏黑葡萄)

称取0.05g夏黑葡萄果皮与果肉，将所称取的葡萄放入10ml上述配的乙醇(80％)：浓盐酸＝99:1混合液中，浸提30分钟测定溶液里花青素的相对含量。

花青素相对含量＝(A₅₃₀-A₆₅₇/4)/M，A₅₃₀为0.454；A₆₅₇为0.192；M为0.05g。

根据上述公式，实施例测得花青素的相对含量为8.12。

实施例2(巨峰葡萄)

称取0.05g巨峰葡萄果皮与果肉，将所称取的葡萄放入10ml上述配的乙醇(80％)：浓盐酸＝99:1混合液中，浸提30分钟测定溶液里花青素的相对含量。

花青素相对含量＝(A₅₃₀-A₆₅₇/4)/M，A₅₃₀为0.651；A₆₅₇为0.256；M为0.05g。

根据上述公式，实施例测得花青素的相对含量为11.74。

实施例3(巨玫瑰葡萄)