[发明专利]基于内吗啡肽2或Biphalin的棕榈酰化修饰的阿片肽类似物及其合成和应用

权利要求书

1.基于内吗啡肽2或Biphalin的棕榈酰化修饰的阿片肽类似物，其化学结构式如下：

化合物

化合物。

2.如权利要求1所述基于内吗啡肽2或Biphalin的棕榈酰化修饰的阿片肽类似物的合成方法，包括以下工艺步骤：

（1）树脂的预处理：将Rink-Amide-MBHA树脂在二氯甲烷中搅拌，使树脂充分溶胀后减压抽干溶剂；

（2）脱除Fmoc保护基：在溶胀、抽干溶剂的树脂中，加入六氢吡啶、1,8-二氮杂环十一碳-7-烯及DMF的混合溶液，搅拌反应3~5min后抽干，重复3次，最后加DMF洗涤，茚检，得到脱除Fmoc基团保护的树脂；

（3）连接子Lys的缩合：将等摩尔比的N-(9-芴甲氧羰酰基)-N'-甲基三苯甲基-L-赖氨酸Fmoc-Lys(Mtt)-OH、N-羟基苯并三氮唑、O-苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲-六氟磷酸盐完全溶解于DMF中，混匀后在混合溶液中加入二异丙基乙胺，混匀后加至步骤（2）所得脱除Fmoc基团保护的树脂中，在氩气保护下搅拌反应60 min，抽干溶剂；用DMF重复洗涤、抽干，茚检后按步骤（2）的工艺脱除Fmoc基团保护，得到脱除Fmoc保护基团的肽树脂；

（4）主链延长：将步骤（3）所得脱除Fmoc保护基团的肽树脂按步骤（2）、步骤（3）的工艺，依次完成Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Phe-OH，Fmoc-Phe-OH或Fmoc-Gly-OH，Fmoc-Pro-OH或Fmoc-(D)Ala-OH，Boc-Tyr(tBu)-OH的缩合和脱Fmoc基团保护，并保留Boc-Tyr(tBu)-OH的Boc保护基团，得到肽树脂Boc-Tyr(tBu)-Pro-Phe-Phe-Lys(Boc)-Lys(Boc)-Lys(Mtt)-Resin或Boc-Tyr(tBu)-(D)Ala-Gly-Phe-Lys(Boc)-Lys(Boc)-Lys(Mtt)-Resin；

（5）Lys侧链Mtt保护基团的脱除：将步骤（4）得到的肽树脂抽干溶剂后，加入体积浓度1%~1.5% 三氟乙酸的二氯甲烷溶液中，搅拌90~120 s后抽干，重复50次；最后加入DMF冲洗，得到脱除Lys侧链Mtt基团保护的肽树脂Boc-Tyr(tBu)-Pro-Phe-Phe-Lys(Boc)-Lys(Boc)-Lys-Resin或Boc-Tyr(tBu)-(D)Ala-Gly-Phe-Lys(Boc)-Lys(Boc)-Lys-Resin；

（6）Lys侧链的棕榈酰化修饰：将步骤（5）所得肽树脂按步骤（2）、步骤（3）的工艺依次完成Fmoc-Glu-OtBu的缩合和脱Fmoc基团保护，茚检，得缩合和脱除Fmoc基团保护的树脂；再将等摩尔比的棕榈酸、N-羟基苯并三氮唑、O-苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲-六氟磷酸盐完全溶解于DMF中，混匀后加入二异丙基乙胺，混匀后加入到上述缩合和脱除Fmoc基团保护的树脂，搅拌反应4~6小时，抽干，用DMF洗涤，得Lys侧链棕榈酰化的肽树脂；

（7）肽链从树脂上的切割：将步骤（6）所得Lys侧链棕榈酰化的肽树脂用二氯甲烷、甲醇交替洗涤，充分抽干溶剂后，加入切割剂，于室温下切割反应2~3小时；过滤，滤液在不高于37℃的条件下充分减压旋干，然后用不高于-10℃的乙醚析出沉淀，加水充分溶解沉淀，分离除去水相中的乙醚；水相通过冷冻干燥得到白色的粗肽固体粉末；

（8）粗肽的脱盐和纯化：以体积浓度15~20%乙酸溶液为流动相，将粗肽固体粉末过Sephadex G25交联葡聚糖凝胶柱；利用紫外检测仪收集主峰后冷冻干燥，得脱盐的肽化合物；再用反相高效液相色谱柱对脱盐的肽化合物进行分离纯化，经分离后收集样品主峰，即为目标产物。

3.如权利要求2所述基于内吗啡肽2或Biphalin的棕榈酰化修饰的阿片肽类似物的合成方法，其特征在于：步骤（2）的混合溶液中，六氢吡啶、1,8-二氮杂环十一碳-7-烯、DMF的体积比为1:1:98。

4.如权利要求2所述基于内吗啡肽2或Biphalin的棕榈酰化修饰的阿片肽类似物的合成方法，其特征在于：步骤（3）中，Fmoc-Lys(Mtt)-OH的量为脱除Fmoc基团保护的树脂摩尔量的2~4倍。