[发明专利]一种抗菌肽的制备方法

权利要求书

1.一种抗菌肽的制备方法，包括如下步骤：

(1)取牛血，进行血细胞破碎后加入菠萝蛋白酶进行酶解；

(2)向酶解液中加入乙酸浸提，离心取上清，调节pH至6.0±0.5，获得牛血抗菌肽的粗提物；

(3)将所述牛血抗菌肽的粗提物上样于SephadexG-100凝胶柱，采用洗脱液进行洗脱，收集具有抗菌活性的洗脱峰；

(4)将步骤(3)收集的具有抗菌活性的洗脱峰上样于SephadexG-25凝胶柱，采用洗脱液进行洗脱，收集洗脱峰，获得所述牛血抗菌肽溶液；

(5)将步骤(4)收集的牛血抗菌肽溶液冷冻干燥。

2.根据权利要求1所述的一种抗菌肽的制备方法，其特征在于：步骤(1)中，所述菠萝蛋白酶与所述牛血的质量配比为1750-35000U：100ml；和/或步骤(1)中，所述酶解的温度为70～90℃，时间为4～6h。

3.根据根据权利要求1所述的一种抗菌肽的制备方法，其特征在于：步骤(2)中，所述向酶解液中加入乙酸为：向所述酶解液中加入等体积的体积百分含量为5％的乙酸水溶液；和/或步骤(2)中，所述浸提为4～37℃震荡16-20h；和/或步骤(2)中，所述离心为6600～10000g4℃离心20～30min。

4.根据根据权利要求1中所述的一种抗菌肽的制备方法，其特征在于：步骤(3)中，所述洗脱液为pH为6.0的浓度为0.2mol/L的乙酸钠水溶液；和/或所述洗脱的速度为10.0mL/cm2·h。

5.根据权利要求1中所述的一种抗菌肽的制备方法，其特征在于：步骤(4)中，所述洗脱液为pH为6.0的浓度为0.2mol/L的乙酸钠水溶液；和/或所述洗脱的速度为10.0mL/cm²·h。