[发明专利]一种黄石爬鮡皮肤石蜡切片的制作方法有效
申请号: | 201510621119.5 | 申请日: | 2015-09-25 |
公开(公告)号: | CN105241698A | 公开(公告)日: | 2016-01-13 |
发明(设计)人: | 赵柳兰;李冬梅;杨淞;杜宗君;王艳;周剑;刘娅;杜军 | 申请(专利权)人: | 四川农业大学;四川省农业科学院水产研究所 |
主分类号: | G01N1/28 | 分类号: | G01N1/28;G01N1/30 |
代理公司: | 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350 | 代理人: | 汤东凤 |
地址: | 611130 四*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 黄石 皮肤 石蜡 切片 制作方法 | ||
1.一种黄石爬鮡皮肤石蜡切片的制作方法,由样品固定、脱水与透明、浸蜡与包埋、切片与展片、染色与封片五个步骤组成,其特征在于:在样品固定后,经流水冲洗1.5-2.5h后再进行脱水处理;脱水与透明、浸蜡与包埋的总时间为12.5h。
2.如权利要求1所述的黄石爬鮡皮肤的石蜡切片制作方法,其特征在于:所述样品固定步骤为将石爬鮡皮肤取下后,用生理盐水清洗后,将皮肤修成1cm×0.5cm×0.5cm大小的组织,投入波恩氏液中固定。
3.如权利要求1所述的黄石爬鮡皮肤石蜡切片的制作方法,其特征在于所述脱水与透明步骤为用梯度乙醇脱水:先后采用浓度为70%的乙醇处理2-12h、80%的乙醇处理1.8-2.2h、90%的乙醇处理70-80min、第一次95%的乙醇处理40-50min、第二次95%的乙醇处理0.8-1.2h、第一次100%的乙醇处理25-35min、第二次100%的乙醇处理25-35min;然后用体积比为1:1的无水乙醇:二甲苯透明预处理25-30min、再用二甲苯处理2次,每次10-20min,使之透明。
4.如权利要求3所述的黄石爬鮡皮肤石蜡切片的制作方法,其特征在于所述脱水与透明步骤为用梯度乙醇脱水:先后采用浓度为70%的乙醇处理2h、80%的乙醇处理2h、90%的乙醇处理75min、第一次95%的乙醇处理45min、第二次95%的乙醇处理1h、第一次100%的乙醇处理30min、第二次100%的乙醇处理30min;然后用体积比为1:1的无水乙醇:二甲苯透明预处理30min、再用二甲苯处理2次,每次15min,使之透明。
5.如权利要求1所述的黄石爬鮡皮肤石蜡切片的制作方法,其特征在于:所述浸蜡与包埋步骤为用体积比为1:1的二甲苯:石蜡进行浸蜡预处理25-35min;再用纯石蜡浸蜡2次,每次85-95min;最后将组织样品用纸盒进行包埋。
6.如权利要求5所述的黄石爬鮡皮肤石蜡切片的制作方法,其具体特征在于:所述浸蜡与包埋步骤为用体积比为1:1的二甲苯:石蜡浸蜡预处理30min;再用纯石蜡浸蜡2次,每次90min,最后将组织样品用纸盒进行包埋。
7.如权利要求1所述的黄石爬鮡皮肤石蜡切片的制作方法,其特征在于:所述切片与展片步骤为用切片机切片,切片厚度控制在5μm-7μm,经35℃-38℃水浴锅中进行展片,用涂有蛋白甘油的载玻片捞片后,在35℃-38℃的烘箱中进行烘片。
8.如权利要求1所述的黄石爬鮡皮肤石蜡切片的制作方法,其特征在于:所述染色与封片步骤中染色采用H.E染色方法。
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