[发明专利]益肝明目口服液的多指标成分含量测定、指纹图谱构建和制备方法

说明书

技术领域

本发明属于中药领域，具体而言，涉及一种益肝明目口服液的多指标成分同时测定的方法，以及益肝明目口服液的制备方法。

背景技术

益肝明目口服液(参见国家药品监督管理局标准(试行)ws-5054(B-0054)-2002)已经被批准上市销售，其处方包括熟地黄、当归、枸杞子、白芍等十二味生药，具有补益肝肾的作用，适用于肝肾不足症见腰膝酸软、头晕目糊、记忆力减退、体倦乏力等病症。

由于其中生药种类繁多，各生药的有效成分更是难以计数，各生产批次间的工艺稳定性不强，导致了各生药的有效成分在各批次间差异很大，所以对最终患者的治疗效果也产生了较大的差异。周志敏(临床合理用药.2009年,2(17):86)以芍药苷作为指标成分，测定了各合格批次的益肝明目口服液的芍药苷含量，最终经专家审议，国家药品监督管理局规定了芍药苷的含量不得低于0.30mg/mL的标准。此后，再没有对益肝明目口服液的深入研究的公开和启示。

然而，经本发明人长期回访，发现即使满足这一规定的各批次益肝明目口服液，甚至严格生产工艺，虽然在行政监管上是合格品，甚至使得芍药苷的含量大幅提高(基本能超过0.9mg/mL)，但是仍旧会对最终患者的治疗效果产生较大的差异；再经过本发明人艰苦的研究，令人意外地在众多生药的有效成分中进一步发现了5种成分(绿原酸、木犀草苷、阿魏酸、川陈皮素、橙皮苷)可以作为与疗效对应的指标成分，从而可以用于全面检测益肝明目口服液的质量并用于改进其制备工艺。另外，经本发明人对测定方法细节的摸索，令人意外地获得这五种成分可以与芍药苷同时进行准确含量测定的测定方法，从检测仪器上可以一次性得出6种成分的有效结果，也可获得指纹图谱，因此几乎不会提高检测成本。

发明内容

本发明所要解决的问题是提供新的益肝明目口服液的测定方法及包括测定方法步骤的制备益肝明目口服液的方法。另外，本发明还提供由此制备的益肝明目口服液及其应用等。

具体而言，在第一方面，本发明提供了益肝明目口服液的多指标成分的测定方法，其包括，用高效液相色谱法检测所述益肝明目口服液，获得所述指标成分的含量，其中所述指标成分是绿原酸、木犀草苷、阿魏酸、川陈皮素、橙皮苷和芍药苷。

益肝明目口服液的多指标成分可以分多次分别测定，但是本发明优选是一次性测定，即一次性获得所述指标成分的含量。

优选在本发明第一方面的测定方法中，所述高效液相色谱法的样品定容溶剂是甲醇。在本发明的具体实施方式中，1体积的益肝明目口服液用甲醇混匀并定容至10体积。

优选在本发明第一方面的测定方法中，所述高效液相色谱法的色谱填料是十八烷基硅烷键合硅胶，更优选是Inertsil ODS-SP或Diamonsil C18。

优选在本发明第一方面的测定方法中，所述高效液相色谱法的流动相A为乙腈，流动相B为体积百分比0.05％的磷酸水溶液。

优选在本发明第一方面的测定方法中，所述高效液相色谱法的进样量为2～50μL，更优选为10～20μL。

优选在本发明第一方面的测定方法中，所述高效液相色谱法的柱温为15～45℃，更优选为20～30℃。

优选在本发明第一方面的测定方法中，所述高效液相色谱法的色谱柱的径长规格为4.6mm×250mm或4.6mm×200mm。

优选在本发明第一方面的测定方法中，所述高效液相色谱法的流速在0.5～1.5mL/min，更优选为0.8～1.0mL/min。

优选在本发明第一方面的测定方法中，所述高效液相色谱法的检测波长为230nm、284nm、325nm和348nm。其中，绿原酸、阿魏酸和川陈皮素的检测波长为325nm，木犀草苷的检测波长为348nm，橙皮苷的检测波长为284nm，和芍药苷的检测波长为230nm。

优选在本发明第一方面的测定方法中，所述指标成分的含量通过如表8所述的方程计算：

表8