[发明专利]一种检测微生物的方法

说明书

本发明涉及食品安全检测领域，公开了一种检测微生物的方法，包括：1)将能够特异地与微生物结合的第一抗体偶联在非磁性微球上得到免疫微球，将能够与第一抗体结合的第二抗体偶联在磁球上得到免疫磁球；2)将免疫微球与液体形式的待测样品进行混合，使得免疫微球能够特异性地吸附微生物；3)将步骤2)得到的混合后的物料与免疫磁球混合，使得第一抗体能够与第二抗体结合；4)将步骤3)得到的混合后的物料进行磁分离，除去未结合在免疫磁球上的物质；5)重悬磁分离得到的沉淀物，并将得到的重悬液进行核磁共振而检测横向弛豫时间，从而判断微生物的含量。本发明能够快速有效地检测样品中微生物的含量，在痕量微生物检测领域极具应用前景。

技术领域

本发明涉及食品安全检测领域，具体地，涉及一种检测微生物(特别是有害微生物)的方法。

背景技术

食品安全是重大民生问题。食源性微生物致病菌有效的监测对于首都食品质量控制和监管尤为重要。针对食品中的病原微生物(如细菌、真菌和病毒等)以及其他有害生物(如寄生虫)，传统的检测方法为分离培养法。分离培养需要前增菌、增菌、生化鉴定或血清学鉴定，整个检测过程需要2-3天甚至5-6天的时间才能完成，而且检测过程中所需的培养基准备、平板培养、菌落计数、生化鉴定等使得检测任务劳动强度大，耗时，不能及时、快速评价食品中微生物的安全性，不利于监管部门对问题食品的快速反应。传统检测病原微生物方法步骤多，所需时间长，速度慢，难以适应食品快速流通检测的需要；现代微生物检测方法虽然检测速度快，但是在细菌浓度较低情况下容易造成漏检。

发明内容

本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种操作简单、检测时间短、灵敏度高的检测微生物的方法。

本发明的发明人进行了大量的研究，结果发现采用具有很高的单分散性、生物相容性、易于修饰功能基团的非磁性微球作为微生物(如沙门氏菌)前浓缩的载体，配合使用免疫磁分离技术与核磁共振技术即可实现微生物的高灵敏度检测。因此，为了实现上述目的，本发明提供了一种检测微生物的方法，该方法包括以下步骤：

(1)将能够特异地与微生物结合的第一抗体偶联在非磁性微球上，得到免疫微球，而将能够与所述第一抗体结合的第二抗体偶联在磁球上，得到免疫磁球；

(2)将免疫微球与液体形式的待测样品进行混合，混合的条件使得当待测样品中存在所述微生物时，免疫微球能够特异性地吸附微生物；

(3)将步骤(2)得到的混合后的物料与免疫磁球混合，混合的条件使得第一抗体能够与第二抗体结合；

(4)将步骤(3)得到的混合后的物料置于分选磁场中进行磁分离，除去未结合在免疫磁球上的物质；

(5)重悬磁分离得到的沉淀物，并将得到的重悬液进行核磁共振而检测横向弛豫时间，根据横向弛豫时间判断待测样品中的微生物的含量。

通过上述技术方案，本发明能够快速有效地检测样品中微生物(特别是细菌、真菌或病毒等)的含量，操作简单易行且特异性强、灵敏度高，在痕量微生物检测领域极具应用前景。

本发明的其它特征和优点将在随后的具体实施方式部分予以详细说明。

附图说明

附图是用来提供对本发明的进一步理解，并且构成说明书的一部分，与下面的具体实施方式一起用于解释本发明，但并不构成对本发明的限制。在附图中：

图1是按照本发明的一种实施方式测得的微生物的含量与△T2值之间的关系图；

图2是根据本发明的方法检测微生物时形成的沙门氏菌-免疫微球-免疫磁球夹心复合结构的扫描电镜照片。

具体实施方式