[发明专利]一种新生兔透明骨骼标本的制作方法

权利要求书

1.一种新生兔透明骨骼标本制作方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤一、取新出生1天的兔，微创去除内脏和脑组织，洗净胸腔和腹腔，使其四肢呈自然伸张状态，用4%的甲醛溶液固定10天或无水乙醇固定7天；

步骤二、用流水冲洗姿态固定的新生兔标本，再用5%过氧化氢溶液或1%氢氧化钾溶液漂白7天；

步骤三、用乙醇由低浓度至高浓度对步骤二漂白处理后的新生兔进行梯度脱水，每个浓度梯度5-7天；

步骤四、先用质量浓度为1%的氢氧化钾溶液对步骤三脱水后的新生兔透明处理2天，之后再用甘油氢氧化钾透明液中透明处理5天，所述甘油氢氧化钾透明液中氢氧化钾的质量浓度为4.5%，甘油所占质量百分比为40%，其余为水；

步骤五、依次用茜素红染色液和阿利新蓝染色液对透明处理后的新生兔进行染色，各染色7天，使骨骼、肌肉和软骨着色；

步骤六、用1%氢氧化钾溶液或20%铵甘油脱色剂对染色后的新生兔标本脱色5天，使肌肉脱去颜色，即得新生兔透明骨骼标本；

步骤七、将步骤六得到的新生兔透明骨骼标本依次用20%甘油溶液、30%甘油溶液、40%甘油溶液、50%甘油溶液、60%甘油溶液、70%甘油溶液和100%甘油梯度脱水，甘油在脱水的同时将肌肉未脱净的颜色或脱色液残留的铵脱去，然后将新生兔透明骨骼标本保存在甘油中。

2.根据权利要求1所述的一种新生兔透明骨骼标本制作方法，其特征在于：步骤三所述乙醇由低浓度至高浓度依次为50%乙醇、70%乙醇、80%乙醇、85%乙醇、90%乙醇、95%乙醇和无水乙醇。

3.根据权利要求1所述的一种新生兔透明骨骼标本制作方法，其特征在于：

步骤五所述茜素红染色液为2%的茜素红乙醇染液或含2%氢氧化钾的0.04%的茜素红染液；所述阿利新蓝染色液由含0.2%阿利新蓝的70%乙醇溶液、70%乙醇溶液与冰醋酸按体积比1:18:1的比例配制而成。