[发明专利]一种维生素A中间体的制备方法

权利要求书

1.一种维生素A中间体3,7-二甲基-9-(2’,6’,6’-三甲基-1-环己烯)基-2,4,7-三烯-1,6-二醇-1-乙酸酯的制备方法，其特征在于所述方法为：以米曲霉(Aspergillusoryzae)WZ007经发酵培养获得的培养液过滤，滤饼干燥获得的干菌体为催化剂，以3,7-二甲基-9-(2’,6’,6’-三甲基-1-环己烯)基-2,4,7-三烯-1,6-二醇为反应底物，以酰化剂的有机溶剂溶液为反应介质，在30～50℃、200rpm条件下进行反应，反应结束后，将反应液过滤，滤饼回收催化剂，滤液即为含维生素A中间体3,7-二甲基-9-(2’,6’,6’-三甲基-1-环己烯)基-2,4,7-三烯-1,6-二醇-1-乙酸酯的混合液，将混合液分离纯化，获得3,7-二甲基-9-(2’,6’,6’-三甲基-1-环己烯)基-2,4,7-三烯-1,6-二醇-1-乙酸酯；所述酰化剂为下列之一：乙烯乙酸酯、乙酸异丙烯酯、乙酸酐或乙酸乙酯。

2.如权利要求1所述维生素A中间体3,7-二甲基-9-(2’,6’,6’-三甲基-1-环己烯)基-2,4,7-三烯-1,6-二醇-1-乙酸酯的制备方法，其特征在于底物用量以反应介质体积计为50～200g/L反应介质，催化剂加入量以反应介质体积计为10～50g/L反应介质，所述酰化剂的有机溶剂溶液中酰化剂体积浓度为1～40％。

3.如权利要求1所述维生素A中间体3,7-二甲基-9-(2’,6’,6’-三甲基-1-环己烯)基-2,4,7-三烯-1,6-二醇-1-乙酸酯的制备方法，其特征在于有机溶剂为下列之一：正己烷、环己烷、甲基叔丁基醚、甲苯、苯、乙醚或氯仿。

4.如权利要求1所述维生素A中间体3,7-二甲基-9-(2’,6’,6’-三甲基-1-环己烯)基-2,4,7-三烯-1,6-二醇-1-乙酸酯的制备方法，其特征在于所述催化剂还可以为从米曲霉(Aspergillusoryzae)WZ007经发酵培养获得干菌体中提取米曲霉WZ007脂肪酶粗酶或米曲霉WZ007脂肪酶粗酶制备的米曲霉WZ007脂肪酶固定化酶。

5.如权利要求1所述维生素A中间体3,7-二甲基-9-(2’,6’,6’-三甲基-1-环己烯)基-2,4,7-三烯-1,6-二醇-1-乙酸酯的制备方法，其特征在于所述干菌体按如下方法制备：(1)斜面培养：将米曲霉WZ007接种至斜面培养基，30～37℃、转速150～200r/min培养2～3天，作为斜面活化种子；斜面培养基终浓度组成：斜面培养基终浓度组成：NaNO₃0.1～0.3％，K₂HPO₄0.1～0.2％，KCl0.3～0.7％，FeSO₄0.001～0.002％，MgSO₄0.04～0.06％，蔗糖2～5％，琼脂1.5～2.0％，溶剂为去离子水，pH自然；

(2)发酵培养：将斜面种子接种至液态发酵培养基，30℃、200r/min培养48小时，过滤，得到菌丝体，0℃冷冻干燥24h，获得干菌体；液态发酵培养基终浓度组成为：葡萄糖2～6％，蛋白胨2～5％，蔗糖1～6％，尿素0.3～0.9％，NaCl0.4～0.8％，K₂HPO₄0.2～0.5％，MgSO₄0.1～0.3％，(NH₄)₂SO₄0.4～0.8％，溶剂为去离子水，pH自然；。

6.如权利要求4所述维生素A中间体3,7-二甲基-9-(2’,6’,6’-三甲基-1-环己烯)基-2,4,7-三烯-1,6-二醇-1-乙酸酯的制备方法，其特征在于米曲霉WZ007脂肪酶粗酶的制备方法为：将米曲霉WZ007经发酵培养后获得的干菌体用pH值为7.0磷酸缓冲液悬浮后的悬浮液进行破碎，离心，取上清液加入硫酸铵至60％饱和度进行沉淀，离心，取沉淀浸泡在pH值为7.0磷酸缓冲液中，-20～0℃冷冻干燥后，获得米曲霉WZ007冻干酶粉，即为米曲霉WZ007脂肪酶粗酶。