[发明专利]一种维生素A中间体的制备方法

说明书

(一)技术领域

本发明涉及一种维生素A中间体的制备方法，特别涉及一种以中间体Ⅰ(3,7-二甲基-9-(2’,6’,6’-三甲基-1-环己烯)基-2,4,7-三烯-1,6-二醇)为反应底物，在脂肪酶的作用下进行区域选择性酰化反应合成中间体Ⅱ(3,7-二甲基-9-(2’,6’,6’-三甲基-1-环己烯)基-2,4,7-三烯-1,6-二醇-1-乙酸酯)的方法。

(二)背景技术

维生素A(vitaminA)[CAS:68-26-8]又称视黄醇，是一个具有脂环的不饱和一元醇，包括维生素A1、A2两种。维生素A是保护眼晴和增进视力的营养素，具有促进生长发育，加强免疫能力和清除自由基等功能。维生素A不足会引发夜盲症。维生素A只存在于动物性食物中，A1存在于哺乳动物及咸水鱼的肝脏中，而A2存在于淡水鱼的肝脏中。虽然维生素A可以从动物组织中获取，但是资源有限，步骤繁琐，成本高。因此目前维生素A主要通过化学合成的方法得到。其中RocheC14+C6合成工艺为世界上采用最广泛的路线。维生素A中间体Ⅱ是该技术路线中的重要中间体，通过维生素A中间体Ⅰ乙酰化得到。维生素A中间体Ⅱ再经过溴代，脱溴重排得到维生素A醋酸酯。

US3671575中使用醋酐或者酰氯做酰化剂，利用吡啶类，胺类有机碱作为催化剂进行酰化反应。该方法存在有机碱在反应后进行酸洗，碱化和除水以及蒸馏分离等步骤，过程复杂且存在大量的能耗和废水。

EP0802261利用lipasePLC、lipasePLG、LipozymeIM-20、chirazymeL-2等商品酶催化维生素A中间体Ⅰ乙酰化合成维生素A中间体Ⅱ，反应条件温和，转化率高。但是商品酶价格昂贵，稳定性较差，造成生产成本较高。

(三)发明内容

本发明目的是为了解决上述方法的不足，通过筛选产脂肪酶微生物，提供了一种廉价高效的脂肪酶，以维生素A中间体Ⅰ为反应底物，在脂肪酶的作用下进行区域选择性乙酰化得到维生素A中间体Ⅱ的方法。

本发明采用的技术方案是：

本发明提供一种维生素A中间体3,7-二甲基-9-(2’,6’,6’-三甲基-1-环己烯)基-2,4,7-三烯-1,6-二醇-1-乙酸酯(Ⅱ)的制备方法，所述方法为：以米曲霉(Aspergillusoryzae)WZ007经发酵培养获得的培养液过滤，滤饼干燥获得的干菌体为催化剂，以3,7-二甲基-9-(2’,6’,6’-三甲基-1-环己烯)基-2,4,7-三烯-1,6-二醇为反应底物，以酰化剂的有机溶剂溶液为反应介质，在30～50℃、200rpm条件下进行反应(更优选30～50℃转化1-48小时，最优选6～24小时，酯化率为90～100％)，反应结束后，将反应液过滤，滤饼回收催化剂，滤液即为含维生素A中间体3,7-二甲基-9-(2’,6’,6’-三甲基-1-环己烯)基-2,4,7-三烯-1,6-二醇-1-乙酸酯的混合液，将混合后分离纯化，获得3,7-二甲基-9-(2’,6’,6’-三甲基-1-环己烯)基-2,4,7-三烯-1,6-二醇-1-乙酸酯(Ⅱ)；所述酰化剂为下列之一：乙烯乙酸酯、乙酸异丙烯酯、乙酸酐或乙酸乙酯。

进一步，底物用量以反应介质体积计为50～200g/L反应介质，催化剂加入量以反应介质体积计为10～50g/L反应介质，所述酰化剂的有机溶剂溶液中酰化剂体积浓度为1～40％。

进一步，有机溶剂为下列之一：正己烷、环己烷、甲基叔丁基醚、甲苯、苯、乙醚或氯仿，更优选正己烷、环己烷、甲基叔丁基醚。

进一步，所述催化剂还可以为从米曲霉(Aspergillusoryzae)WZ007经发酵培养获得干菌体中提取米曲霉WZ007脂肪酶粗酶或米曲霉WZ007脂肪酶粗酶制备的米曲霉WZ007脂肪酶固定化酶。