[发明专利]一种发光免疫检测用集成试剂管及其使用方法

说明书

技术领域

本发明涉及全血化学发光免疫检测，特别是用于体外诊断即时检测用的一种发光免疫检测用集成试剂管及其使用方法。

背景技术

发光免疫分析技术因其高灵敏度、良好的稳定性以及在自动化设备上多样性柔性操作，在现代临床免疫学检测方法中居于核心地位，迅速替代了放射免疫分析技术；与人体生理、病理相关的生物活性物质或疾病标志物，以及外来抗原均可藉此实现微量定量检测，用于疾病诊断、疗效评价及预后判断。

由于试剂结构的多组份特性，现今发展的全自动检测系统涉及多环节液体转移，并因多样品上机运行，相应进样、出样装置需要反复不断清洗，使得仪器变得庞大、复杂，制作困难，故障率较高；而且不能检测全血样品，仅能检测血清、血浆等样品，只限于中心实验室用，因而检测周转期(turnaroundtime,　TAT)较长，不适合病人所在现场检测，难于满足即时检测需求。

法国梅里埃的BioMerieuxVidas、日本三菱化学PATHFAST以磁微粒为固相的全血样品快速定量检测装置；这类装置将其它液体组份预先分装成单人份的集成结构；此类产品存在液体易挥发、保存期短，以及分、封装繁琐和易于交叉污染等问题；且仪器与检测品种高度专一，其他项目上机兼容性差，检测指标有限，检测通量小，扩展能力差，不利于资源利用。

以胶体金和荧光物质为标记物的硝酸纤维素膜固相侧向免疫层析技术产品，是目前一大类即时检测（PointofCareTest,POCT）产品。简便是其突出的特点，然而，由于材料变异大、工艺与检测过程有缺陷，产品质量可控性差，使得此类产品灵敏度低，不精密度高，重复性差，定量准确性不足；只能用于对高危人群的初筛，不能用作疾病诊断的常规工具。

以醋酸纤维素膜为固相、胶体金为标记物的斑点免疫渗滤法也是一种快速检测法。其结构是在醋酸纤维素膜上特定位置点样固定有特定抗体（抗原），将此固相膜与其下的吸水材料纤维固定在一塑料盒中。检测时，先点上样品，反应一定时间后，再滴入胶体金标记物，形成固相-样品待测定物-胶体金复合物，呈现有色反应物，从而实现对目标物的定性检测。未反应的成分通过醋酸纤维素间隙在吸水材料的毛细管力作用下吸至吸水材料中。此方法分析能力与侧向免疫层析分析相当。其固相过程是粗放型被动吸附作用，固相的量不确定，未被吸附的固相成分在后续检测时会带走待测物，影响检测灵敏度。膜只能结合固相成分而不能作为胶体金标记物吸附载体而形成一体结构。由于膜致密透光性差，发光分析时会阻碍光线传播，吸光分析难于比色，只能用扫描或目测法进行定性或半定量检测。由于未反应物是有限分离的，效率不高，亦不彻底，故灵敏度低。不能滤过分离红细胞等成分，因而不能用于测定全血样品。

发明内容

本发明的第一个目的是提供体外诊断即时检测用的一种发光免疫检测用集成试剂管，以克服现有即时检测（以胶体金和荧光标记的侧向免疫层析技术为代表）灵敏度低、准确性和重复性差等问题，使本集成试剂管结构可检测全血等样品而用于即时检测，并具备常规诊断工具一样的灵敏度、准确性。

本发明的第二个目的是提供上述集成试剂管的使用方法，以实现在上述集成试剂管中完成全血处理、进样、免疫反应、洗涤、发光反应与测定相对发光单位（RLU）等检测过程，省去了检测时添加试剂标记物、固相物的过程，大大缩短检测时间，并具有高灵敏度和良好的重复性；满足对全血、血清、血浆及其他体液中目标免疫分子进行定性、定量的即时检测需求。

本发明提供的一种发光免疫检测用集成试剂管，包括一可预先固相化的微孔杯，其特征在于其还包括：一样品过滤装置，样品过滤装置包括一与微孔杯杯口拆装配合的套接件，一固定在套接件上的塑料制样品滤杯悬置在微孔杯内的上半部，样品滤杯的杯腔底面上固定有自上而下由样品滤膜和标记物膜层叠构成的一结合膜；待测物通过样品过滤装置初始反应后滴入预先固相的微孔杯再反应得到发光免疫检测用目标物反应链。

所述的套接件的形状为与微孔杯杯口外壁套合的环状，样品滤杯设置在套接件环心部，样品滤杯外壁与套接件之间通过相间隔的若干隔梁连接固定，相邻隔梁的间隔空间连通微孔杯杯口内外。

所述的样品过滤装置中还包括一顶压固定结合膜边沿的卡环，套入样品滤杯杯腔内的卡环把结合膜压紧在杯腔的底面上；样品滤杯底面下设有连通样品滤杯杯腔内外的滴液管。

所述的微孔杯的微孔孔腔由上部一圆通孔和下部一具有增加向上投照和反射聚光面积的侧环壁的杯孔连接构成，所述杯孔的底面和/或侧环壁上凸出地设置有增加向上投照和反射聚光面积的反光。

所述的杯孔为倒圆台孔、喇叭形孔、倒球带孔或倒圆梯台孔。