[发明专利]一种快速提取和分离牡丹种子中脂类成分的方法

权利要求书

1.一种快速提取和分离牡丹种子中脂类成分的方法，其包括以下步骤：

1)提取总脂

取牡丹种子，于30～60℃烘干、去壳、液氮研磨成粉末，将粉末用氯仿和甲醇的混合液于30～40℃抽提0.5～2h，得到抽提液，再加入氯仿和水，振荡混匀，静置或离心后，分层，分离出有机相；将提取后的剩余残渣重复上述步骤1～2次，合并各次分离出的有机相，用氮气吹干，得到牡丹种子总脂；

2)分离总脂中的中性脂、糖脂和磷脂

用氯仿平衡硅胶柱，将得到的牡丹种子总脂上样至硅胶柱中，先用氯仿洗脱，得到氯仿洗脱液；再用丙酮洗脱，得到丙酮洗脱液；最后用甲醇洗脱，得到甲醇洗脱液；

将氯仿洗脱液、丙酮洗脱液、甲醇洗脱液浓缩干燥后分别得到中性脂、糖脂、磷脂；

3)展开并分离中性脂、糖脂和磷脂中的不同成分

将步骤2)得到的中性脂、糖脂和磷脂溶解后，分别点样于硅胶板上，将硅胶板置于染缸中进行展开；

用展示剂一对糖脂和磷脂进行展开、显色、分离；其中，分离糖脂后得到单半乳糖二脂酰甘油、双半乳糖二脂酰甘油和硫代异鼠李糖二脂酰甘油；分离磷脂后得到磷脂酰乙醇胺、磷脂酰胆碱、磷脂酸、磷酯酰丝氨酸、磷脂酰甘油；所述展示剂一为乙酸乙酯、异丙醇、氯仿、甲醇和0.2％～0.3％KCl水溶液的混合液，其中乙酸乙酯：异丙醇：氯仿：甲醇：0.2％～0.3％KCl水溶液的体积比为25：25：25：10：7.2～10.8；

用展示剂二对中性脂进行展开、显色、分离，得到三酰甘油；所述展示剂二为正己烷、乙醚和冰乙酸的混合液，其中正己烷：乙醚：冰乙酸的体积比为40：10：0.5～1.5。

2.根据权利要求1所述快速提取和分离牡丹种子中脂类成分的方法，其特征在于，步骤1)中氯仿和甲醇的混合液中氯仿和甲醇的体积比为1:1.8～2.2。

3.根据权利要求1或2所述快速提取和分离牡丹种子中脂类成分的方法，其特征在于，步骤1)中氯仿总量：甲醇：水的体积比为1:1:0.85～0.95。

4.根据权利要求1所述快速提取和分离牡丹种子中脂类成分的方法，其特征在于，步骤3)中的显色方法为：喷洒显色剂后于120～140℃下烘干3～5min完成显色。

5.根据权利要求4所述快速提取和分离牡丹种子中脂类成分的方法，其特征在于，所述的显色剂为磷酸和硫酸铜溶液。