[发明专利]一种沙格列汀中有关物质的检测方法

说明书

本发明公开了一种沙格列汀中有关物质的检测方法，该方法采用反相高效液相色谱法，选用十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱，以高氯酸钠溶液‑甲醇‑乙腈为流动相进行梯度洗脱，流速为0.4‑1.0mL/min，柱温20‑40℃，样品的检测波长为210‑220nm。

技术领域

本发明涉及化学领域。具体地，本发明涉及一种沙格列汀中有关物质的检测方法。

背景技术

沙格列汀，化学名称：(1S,3S,5S)-2-[(2S)-2-氨基-2-(3-羟基-1-金刚烷基)乙酰基]-2-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-腈，其结构式为：

沙格列汀是一种二肽基肽酶-4(Dipeptidyl Peptidase 4，DPP-4)抑制剂，通过选择性抑制DPP-4，可以升高内源性胰高血糖素样肽-1(Glucagon-like Peptide-1，GLP-1)和葡萄糖依赖性促胰岛素释放多肽(Glucose-dependent Insulinotropic Peptide，GIP)水平，从而调节血糖。

有关物质指的是在生产过程中带入的起始原料、中间体、聚合体、副反应产物，以及贮藏过程中的降解产物等。就本申请而言，沙格列汀中可能含有的主要有关物质包括IM-A、IM-B、IM-C、IM-D、IM-E、IM-F及中间体IM-I；其中IM-D和IM-E分别为IM-B和IM-C的烯醇式结构；IM-A、IM-B和IM-C的结构分别如下所示：

虽然目前已有沙格列汀有关物质的检测方法的进口注册标准，但该方法无法有效分离杂质IM-A和IM-B，并且沙格列汀峰拖尾严重。

因此，为了有效分离杂质峰，改善沙格列汀峰的峰形，需要开发一种新的沙格列汀中有关物质的检测方法。

发明内容

本发明的发明人经过研究，发明了一种沙格列汀中有关物质的检测方法。

本发明的检测方法选用十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱，以高氯酸钠溶液-甲醇-乙腈为流动相进行梯度洗脱。

本发明的检测方法能够更好地将有关物质按极性大到极性小的顺序洗脱出来，且各目标峰峰形良好，各杂质峰均得到良好的分离。

附图说明

图1示出了实施例1的高效液相色谱图。

图2示出了实施例2的高效液相色谱图。

图3示出了实施例3的高效液相色谱图。

图4示出了对比实施例的高效液相色谱图。

具体实施方式

本发明提供一种沙格列汀中有关物质的检测方法，其特征在于，选用十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱，以高氯酸钠溶液为A相、甲醇为B相、乙腈为C相进行梯度洗脱，流速为0.4～1.0mL/min，柱温20～40℃，样品溶液的浓度为0.2-1.0mg/mL，进样量5-30μL，样品的检测波长为210-220nm。

在本发明的一个优选实施方案中，所述十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱的填料的颗粒度为3-7μm，优选为3-5μm，色谱柱的规格为4.6×250mm或4.6×150mm。

在本发明的一个优选实施方案中，所述高氯酸钠溶液的浓度为0.05-0.15mol/L，优选0.07-0.125mol/L，更优选0.08-0.12mol/L，最优选0.09-0.11mol/L。

在本发明的一个优选实施方案中，其中使用三氟乙酸或高氯酸将A相的pH调至0.5-5，优选调至pH 1-4，最优选调至pH 1.5-3.5。