[发明专利]一种新型抗原群的H9N2禽流感病毒及其用途

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，涉及一种禽流感病毒，具体来说是一种新型抗原群的H9N2禽流感病毒及其用途。

背景技术

H9N2亚型禽流感病毒(Avianinfluenzavirus，AIV)自上个世纪90年代以来已经广泛在我国和世界各地流行，不仅仅给养禽业造成了巨大的经济损失，而且给公共卫生安全造成的隐患不可估量，对人类的健康也构成了巨大的威胁。在我国，独特的地理环境及养殖模式为此病的发生、传播提供了有利条件。而免疫压力及活禽市场的存在又为H9N2亚型禽流感病毒的重组和变异提供了必要条件。目前，H9N2亚型的疫苗已用于常规免疫，在一定程度上控制了H9N2亚型AIV的暴发流行。但是，由于禽流感病毒具有传播快、感染宿主具有多样性，病毒株血清型众多、不同毒株间毒力差异大、变异性强等特点，造成局部地区仍有流行，且非典型性流行增多，免疫失败也屡见不鲜。Radu等及Kilbourne等指出疫苗株应经常改变，因为老的疫苗株通常仅对新毒株产生部分的保护力。1999年，Garcia等证实禽流感暴发期间AIV分离株有很高的变异性，从而导致疫苗无效。Suarez等认为，AIV的变异可引起禽类甚至人类疫苗免疫的失败。刘红旗等研究指出，HA基因的变异可能与频繁的疫苗免疫选择压力有关。本试验拟通过HI交叉试验来比较分析2002年，2006-2014年上海地区分离的H9N2亚型禽流感病毒之间的抗原相关性，探讨其抗原性是否发生漂移，为H9N2亚型禽流感的防制提供参考依据。为了了解不同年份分离的H9N2亚型禽流感病毒与目前使用的疫苗株CK/SH/F/98之间的抗原相关性，挑选2002年，2006-2014年间在上海地区分离的14株H9N2亚型禽流感病毒以及CK/SH/F/98病毒，通过HI交叉试验进行抗原性比较和分析。HI试验结果显示：2002年，2006-2014年间在上海地区流行的H9N2亚型不同毒株间已经发生了抗原性的漂移，划分成4个不同的抗原群，A/chicken/Shanghai/Y1/2002，A/chicken/Shanghai/Y1/2006和A/duck/Shanghai/C60/2007同属于一个抗原群，命名为A群；A/chicken/Shanghai/C/2011独自成为一个抗原群，命名为B群；A/pigeon/Shanghai/JC1/2013和A/chicken/Shanghai/1107/2013归为同一个抗原群，命名为D群；其余毒株均为一个抗原群，命名为C群。从抗原性聚类分析发现14株病毒均从CK/SH/F/98演化而来。综上所述，整体来看一方面H9N2病毒是随时间的增长，抗原发生了不同程度的漂变，但是也存在在某个时间段，多种抗原群共存的情况。该研究结果从理论上为我市制定禽流感防控策略、有效防制H9N2流行提供了科学的指导，为生产上H9N2亚型流感免疫与制苗毒株的选择提供参考依据。

发明内容

针对现有技术中的上述技术问题，本发明提供了一种新型抗原群的H9N2禽流感病毒及其用途，所述的这种新型抗原群的H9N2禽流感病毒及其用途解决了现有技术中无法预防新的禽流感病毒从而导致新的禽流感疫情在禽类或者人类传播的技术问题。

本发明提供了一种分离的H9N2禽流感病毒(抗原群D群)，其基因组由SEQIDNO：1、SEQIDNO：2、SEQIDNO：3、SEQIDNO：4、SEQIDNO：5、SEQIDNO：6、SEQIDNO：7和SEQIDNO：8所示的RNA片段组成。

本发明还提供了一种分离的H9N2禽流感病毒，其保藏号为CGMCCNO：10925。

本发明还提供了一种用于预防上述的H9N2禽流感病毒的疫苗，含有灭活的上述的H9N2禽流感病毒。

本发明还提供了上述的用于预防H9N2禽流感病毒的疫苗的制备方法，包括如下步骤：

a)，一个疫苗抗原液制备及毒价测定的步骤，将权利要求1或2所述的H9N2禽流感病毒用灭菌生理盐水稀释后，接种非免疫鸡胚，收取尿囊液，测定其毒价：在10^9.6-10^9.8EID50，HA价在1：256-512之间，病毒液置冰箱中保存备用；

b)，一个抗原液灭活的步骤，将福尔马林溶液加入病毒液中，检验合格后作为制备抗原液；

c)，一个制备油相佐剂的步骤；

d)，一个制备疫苗水相的步骤；

e)，一个配制疫苗的步骤，将油相与水相预混后，再将混合物注入到高压匀浆泵内乳化，制成油包水乳剂即为疫苗。