[发明专利]一种从经血中制备宫内膜间充质干细胞的方法

权利要求书

1.一种从经血中制备宫内膜间充质干细胞的方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：

(a)在女性经期将卫生栓置入阴道中，其中，所述卫生栓包括吸收栓体(12)和固定在所述吸收栓体(12)上的拉线(14)；所述吸收栓体(12)具有吸水纤维芯体(24)，且所述吸水纤维芯体(24)上包裹有纱布吸收层(22)，所述纱布吸收层(22)上具有开口向外的凹槽(23)，所述凹槽(23)中嵌入有吸水凝胶条，且所述吸水凝胶条的外接触面高于所述纱布吸收层(22)的外接触面；置入的时间使得所述纱布吸收层(22)上吸附有经血和/或脱落的子宫内膜组织；

(b)拉出所述拉线(14)取出所述卫生栓，拆下所述纱布吸收层(22)，然后用洗脱液将所述纱布吸收层(22)上所吸附的经血和/或脱落的子宫内膜组织洗脱下来，得到洗脱产物；

(c)从所述洗脱产物中分离出有核细胞，并进行细胞培养。

2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述凹槽(23)的数量为1-10条，且所述凹槽(23)的走向与所述吸收栓体(12)的轴向平行；所述凹槽(23)的最大深度为所述纱布吸收层(22)的最大厚度的20-70％。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其中，所述吸水凝胶条具有低于所述纱布吸收层(14)的外接触面的尾部(32)和高于所述纱布吸收层(14)的外接触面的头部(31)，且所述头部(31)沿所述纱布吸收层(14)的表面延伸至卡止在所述凹槽(23)的开口上。

4.根据权利要求1或2所述的方法，其中，所述吸水纤维芯体(24)的平均长度为5-7cm，平均直径为1-10mm；所述纱布吸收层(22)的最大厚度为2-5mm。

5.根据权利要求1所述的方法，其中，所述卫生栓还包括容纳所述吸收栓体(12)的包装管(11)；所述包装管(11)的两端具有开口，所述卫生栓还包括活塞(13)；

将卫生栓置入阴道中的操作包括：推动所述活塞(13)经过所述包装管(11)一端的开口进入所述包装管(11)并在所述包装管(11)中沿轴向移动直至将所述吸收栓体(12)从所述包装管(11)的另一端的开口推出至阴道中。

6.根据权利要求1所述的方法，其中，所述纱布吸收层(22)的材质为无菌脱脂棉纱布；所述吸水纤维芯体(24)的材质为人造丝、棉、粉碎木材浆纸、羊毛、绢、进行化学修饰或者交联的纤维素纤维、合成纤维和泥炭苔绒中的至少一种；所述吸水凝胶条为吸水硅胶条和/或聚丙烯酰胺吸水凝胶条。

7.根据权利要求1所述的方法，其中，所述纱布吸收层(22)为经过包被液预处理无菌脱脂棉纱布，所述包被液预处理的操作包括：将所述无菌脱脂棉纱布浸没于包被液中，然后捞出并挤出多余液体后进行干燥，再压制成型；其中，所述包被液为含有40-60ng/mL的多聚赖氨酸、1250-2500U/mL的肝素和5-20ng/μL的纤连蛋白且pH值为7.2-7.5的缓冲液。

8.根据权利要求1或7所述的方法，其中，所述洗脱液为含有50-200μg/mL青霉素、50-200μg/mL链霉素、1.5-4μg/mL两性霉素B和30-50μg/mL环丙沙星和4-8mg/mL肝素且pH值为7.2-7.5的缓冲液。

9.根据权利要求1所述的方法，其中，从所述洗脱产物中分离出有核细胞的操作包括：将所述洗脱产物与红细胞裂解液混合，然后(800-1200)×g离心后去除液体，得到沉淀，然后将所述沉淀剪碎为1-5mm³大小的碎块，再进行贴壁细胞培养。

10.根据权利要求1或9所述的方法，其中，进行细胞培养所用的培养基为添加了3-5mmol/L谷氨酰胺、4-6mg/mL的人血清替代物、8-12ng/mL的EGF、8-12ng/mL的PDGF-BB、50-200μg/mL青霉素和50-200μg/mL链霉素链霉素的αMEM培养基。