[发明专利]一种从经血中制备宫内膜间充质干细胞的方法

说明书

技术领域

本发明涉及生物医药技术领域，具体地，涉及一种从经血中制备宫内膜间充质干细胞的方法。

背景技术

间充质干细胞(MesenchymalStemCell，MSC)是干细胞的一种，因能分化为间质组织而得名，具有自我更新能力和多向分化潜能，可用于造血支持和促进干细胞植入及免疫调控等多种功能。随女性经血脱落的子宫内膜组织中具有相当数量的间充质干细胞，被称之为宫内膜间充质干细胞。宫内膜间充质干细胞细胞数量多，是骨髓来源干细胞的30倍；体外增殖能力强：24小时扩增一倍，可增殖390次，传代高达50次；分化潜能性大：能表达Oct-4、SSEA-4和CD117等干细胞标志物，与骨髓干细胞相近；而且免疫原性低，是一类免疫缺陷细胞，异体移植无免疫排斥反应或反应较弱，因此在再生医学领域具有巨大的潜能。

经血随月经周期每月排出，从经血中可以分离出宫内膜干细胞。但经血与人体分离前易污染，收集、保存较为困难。目前，从女性经血中提取间充质干细胞，主要通过月经杯(DivaCup)来进行经血及随经血脱落组织的采集，中国专利申请CN201210116237.7和CN201410836460.8中均有涉及月经杯的使用。月经杯作为提取宫内膜干细胞使用的一次性器具，通常为医用硅胶材质，造价较高，且有大小型号之分，未使用过月经杯的多数女性很难判别应选择何种型号的杯体适合自己使用。使用型号大小不适宜的月经杯会导致体内异物感、经血渗漏及采集失败。月经杯在我国较为少用，不符合我国女性的经期用品使用习惯，且把月经杯放进阴道较为麻烦，需要使用练习时间。未婚女性担心月经杯损坏处女膜，已婚女性也担心会影响阴道结构而导致阴道松弛。个别女性因阴道结构的差异，不易放置月经杯。另外，月经杯置入体内4-5小时取出进行清洗、消毒后再放回体内，不便于职业女性在工作中使用。现有的卫生棉条虽然可以吸收经血，但是吸收在卫生棉条上的经血中的细胞无法从卫生棉条中释放出来，并且子宫内膜组织块也无法回收，因而不能用于提取宫内膜间充质干细胞。因此，目前从经血中制备宫内膜间充质干细胞的方法存在临床上使用困难且宫内膜间充质干细胞增殖活性低。

发明内容

本发明的目的是提供一种从经血中制备宫内膜间充质干细胞的方法，该方法在临床上非常容易使用，且能够取得较高的宫内膜间充质干细胞增殖活性。

为了实现上述目的，本发明提供了一种从经血中制备宫内膜间充质干细胞的方法，该方法包括如下步骤：(a)在女性经期将卫生栓置入阴道中，其中，所述卫生栓包括吸收栓体和固定在所述吸收栓体上的拉线；所述吸收栓体具有吸水纤维芯体，且所述吸水纤维芯体上包裹有纱布吸收层，所述纱布吸收层上具有开口向外的凹槽，所述凹槽中嵌入有吸水凝胶条，且所述吸水凝胶条的外接触面高于所述纱布吸收层的外接触面；置入的时间使得所述纱布吸收层上吸附有经血和/或脱落的子宫内膜组织；(b)拉出所述拉线取出所述卫生栓，拆下所述纱布吸收层，然后用洗脱液将所述纱布吸收层上所吸附的经血和/或脱落的子宫内膜组织洗脱下来，得到洗脱产物；(c)从所述洗脱产物中分离出有核细胞，并进行细胞培养。

通过上述技术方案，本发明能够方便地在临床上使用，能够为经血捐赠者接受，并且所获得的宫内膜间充质干细胞具有更高的增殖活性。

本发明的其他特征和优点将在随后的具体实施方式部分予以详细说明。

附图说明

附图是用来提供对本发明的进一步理解，并且构成说明书的一部分，与下面的具体实施方式一起用于解释本发明，但并不构成对本发明的限制。在附图中：

图1是本发明的卫生栓结构示意图。

图2是本发明的卫生栓中的吸收栓体的结构示意图。

图3是本发明的卫生栓中的吸收栓体的横截面结构示意图。

图4是测试实施例1中的P0代宫内膜间充质干细胞生长状态图。

图5是测试实施例2中的生长曲线图。

图6是测试实施例3中的凝胶克隆接种实验结果图。

图7是测试实施例5中的宫内膜间充质干细胞的三系分化结果图，由左到右分别成骨(A)、成脂(B)和成软骨(C)分化结果。

附图标记说明

11包装管12吸收栓体13活塞

14拉线

21开孔22纱布吸收层

23凹槽24吸水纤维芯体

31头部32尾部

具体实施方式

以下结合附图对本发明的具体实施方式进行详细说明。应当理解的是，此处所描述的具体实施方式仅用于说明和解释本发明，并不用于限制本发明。