[发明专利]一种受β-环糊精抑制减弱的环糊精葡萄糖基转移酶突变体

权利要求书

1.一种环糊精葡萄糖基转移酶突变体，其特征在于，是将氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的环糊精葡萄糖基转移酶的第600位的亮氨酸突变为酪氨酸，得到突变体L600Y。

2.编码权利要求1所述突变体的基因。

3.含有权利要求2所述基因的载体或细胞。

4.一种获得权利要求1所述突变体的方法，其特征在于，根据SEQ ID NO.1所示的基因序列，设计定点突变引物，对基因进行定点突变，获得编码突变体L600Y基因，并在枯草芽孢杆菌中进行表达。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，以枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)WB600为表达宿主。

6.根据权利要求5所述方法，其特征在于，挑取含突变质粒的表达宿主B.SubtilisWB600的单克隆于LB培养基中，在37℃、200r/min下培养8～12h，以4％(v/v)接种量接种到TB培养基中，在37℃、200r/min下发酵24～48h；将发酵液于4℃、10000rpm离心20min以除去菌体，收集上清液并纯化，分别得到突变体酶制品。

7.一种减弱CGT酶产物抑制的方法，其特征在于，是将氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的CGT酶的第600位的亮氨酸突变为酪氨酸。

8.权利要求1所述环糊精葡萄糖基转移酶突变体在环糊精生产中的应用。

9.权利要求1所述环糊精葡萄糖基转移酶突变体在β-环糊精生产中的应用。