[发明专利]粪便样本保存液及其制备方法和应用在审
申请号: | 201510671258.9 | 申请日: | 2015-10-15 |
公开(公告)号: | CN106596211A | 公开(公告)日: | 2017-04-26 |
发明(设计)人: | 赵艳敏;易吉;朱家楼 | 申请(专利权)人: | 深圳华大基因研究院 |
主分类号: | G01N1/28 | 分类号: | G01N1/28 |
代理公司: | 北京清亦华知识产权代理事务所(普通合伙)11201 | 代理人: | 李志东 |
地址: | 518083 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 粪便 样本 保存 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种粪便样本保存液,其特征在于,包含:
45体积%-60体积%的固定剂;
0.1质量%-15质量%的固定剂辅助剂;
0.01质量%-1.5质量%的抗凝剂;
10体积%-15体积%的缓冲液;
0.01质量%-1质量%的离子强度维持剂;
0.01体积%-0.5体积%的非离子去污剂;以及
余量为水,
其中,
所述固定剂为选自甲醇、乙醇、乙二醇和异丙醇的至少一种,
所述固定辅助剂为选自醋酸和醋酸盐的至少一种,
所述抗凝剂为选自乙二胺四乙酸和乙二胺四乙酸的水溶性盐的至少一种,
所述缓冲液为选自磷酸盐缓冲液、醋酸盐缓冲液、ACES缓冲液、ADA缓冲液、BIS-TRIS缓冲液、MES缓冲液和PIPES缓冲液的至少一种,
所述离子强度维持剂为氯化盐,
所述非离子去污剂为选自吐温20、NP-40和TritonX-100的至少一种。
2.根据权利要求1所述的粪便样本保存液,其特征在于,所述缓冲液的pH值为7.4-8.0。
3.根据权利要求1所述的粪便样本保存液,其特征在于,所述粪便样本保存液的pH值为7.4-8.0。
4.根据权利要求1所述的粪便样本保存液,其特征在于,所述离子强度维持剂为选自氯化钠和氯化钾的至少一种,
任选地,所述抗凝剂为乙二胺四乙酸二钠。
5.根据权利要求1所述的粪便样本保存液,其特征在于,所述固定剂的含量为50体积%-60体积%,
任选地,所述抗凝剂的含量为0.1质量%-1.5质量%,
任选地,所述离子强度维持剂的含量为0.5质量%-1质量%。
6.根据权利要求5所述的粪便样本保存液,其特征在于,包含:
50体积%-60体积%的甲醇;
0.1质量%-15质量%的醋酸;
0.1质量%-1.5质量%的乙二胺四乙酸二钠;
10体积%-15体积%的磷酸盐缓冲液;
0.5质量%-1质量%的氯化钠;
0.01体积%-0.5体积%的吐温-20;以及
余量为水,
任选地,1000ml的粪便样本保存液包含:
500ml甲醇;
3.5g醋酸;
1g乙二胺四乙酸二钠;
100ml磷酸盐缓冲液;
10g氯化钠;
0.5ml吐温-20;以及
399.5ml水。
7.根据权利要求1所述的粪便样本保存液,其特征在于,1000ml的粪便样本保存液包含:
450ml乙醇;
1g醋酸;
3g乙二胺四乙酸二钠;
100ml醋酸盐缓冲液;
1g氯化钾;
0.1ml吐温-20;以及
449.9ml水,
任选地,1000ml的粪便样本保存液包含:
550ml乙二醇;
2.5g醋酸;
7g乙二胺四乙酸二钠;
150mlPIPES缓冲液;
5g氯化钠;
2.5ml NP-40;以及
297.5ml去离子水。
8.一种制备粪便样本保存液的方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)按照权利要求1-7任一项所述的粪便样本保存液的配方提供原料;
2)向去离子水中加入离子强度维持剂、缓冲溶液和抗凝剂,并使各成分溶解混匀,以便得到混合物;
3)将所述混合物进行pH值调节至pH为7.4-8.0;
4)向经过pH值调节的混合物中加入固定剂、固定剂辅助剂和非离子去污剂,混匀后灭菌,以便得到所述粪便样本保存液。
9.权利要求1-7任一项所述的粪便样本保存液在保存粪便样本中的用途。
10.一种保存粪便样本的方法,其特征在于,包括:
将权利要求1-7任一项所述的粪便样本保存液和粪便样本按照体积比1-3:1的比例混匀, 于室温下密封避光保存,
任选地,所述粪便样本保存液和所述粪便样本的体积比为1.5:1。
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