[发明专利]中国人群肥胖易感基因SNP分型用试剂盒及其使用方法

权利要求书

1.一种中国人群肥胖易感基因SNP分型用试剂盒，其特征在于：该试剂盒包括以下内容：

（1）PCR反应试剂：包括10×PCR缓冲液、Mg²⁺离子、底物dNTP、FastTaq酶，SNaPshot混合液；

（2）按一定比例混合的针对10个肥胖易感基因11个区段进行多重PCR扩增的正向引物和反向引物；

（3）按一定比例混合的针对10个肥胖易感基因12个SNP位点的PCR延伸引物；

（4）PCR产物纯化试剂：包括核酸外切酶、虾-碱性磷酸酶及其配套的缓冲液；

（5）对照标本：包括单个SNP位点纯合、杂合突变的阳性对照标本、阴性对照标本；

所述试剂盒以FTO基因rs9939609位点和rs8050136位点、LEPR基因rs1137100位点、APOE基因rs429358位点和rs7412位点、MC4R基因rs17782313位点、UCP2基因rs660339位点、ADRB3基因rs4994位点、PPARγ2基因rs1801282位点、GNPDA2基因rs10938397位点、KCTD15基因rs29941位点、NEGR1基因rs3101336位点共12个位点为检测对象，针对每个SNP位点的突变分别设计出扩增引物和延伸引物，针对各个SNP位点进行多重PCR扩增和标记延伸，通过毛细管电泳分析，同时获得12个SNP位点的基因型；

所述FTO基因rs9939609位点扩增的正向引物和反向引物是5’-CTGGCTCTTGAATGAAATAGGA-3’和5’-GTCACACTCAGCCTCTCTACCA-3’；

所述FTO基因rs8050136位点扩增的正向引物和反向引物是5’-TGTGACAGTGCCAGCTTCAT-3’和5’-CACCAAGATGGTCATGTCTGAT-3’；

所述LEPR基因rs1137100位点扩增的正向引物和反向引物是5’-TTGCCTGCTGGACTCTCAA-3’和5’-AGAGATATTCCTTGCCTGAAGA-3’；

所述APOE基因rs429358位点扩增的正向引物和反向引物与所述APOE基因rs7412位点扩增的正向引物和反向引物相同，均是5’-CTGATGGACGAGACCATGAAG-3’和5’-TCGGCGTTCAGTGATTGTC-3’；

所述MC4R基因rs17782313位点扩增的正向引物和反向引物是5’-AGGCTCTGCTCTGTGTCTCTT-3’和5’-CTTCTGGAGGCAGGTTCTGT-3’；

所述UCP2基因rs660339位点扩增的正向引物和反向引物是5’-CATCGCAGATCTCATCACCT-3’和5’-TGCTCCATACTCACGCTCAG-3’；

所述ADRB3基因rs4994位点扩增的正向引物和反向引物是5’-CTCTCATGCCTTGCTGTC-3’和5’-GGTTGGTCACAGCCAGGTA-3’；

所述PPARγ2基因rs1801282位点扩增的正向引物和反向引物是5’-GACAGTGCCAGCCAATTCA-3’和5’-TGAACGCGATAGCAACGAG-3’；

所述GNPDA2基因rs10938397位点扩增的正向引物和反向引物是5’-TCTGTGCAGAGATGGCTGAT-3’和5’-GTGGTGATTCCACTGGCATA-3’；

所述KCTD15基因rs29941位点扩增的正向引物和反向引物是5’-TCATGCCTGGATGCACAAC-3’和5’-GATCTCACAACCAGCGAGTTC-3’；

所述NEGR1基因rs3101336位点扩增的正向引物和反向引物是5’-CCACGTAAAAGCCTGTCAGA-3’和5’-TGACCAGGGATGGAGCTATG-3’；

所述FTO基因rs9939609位点的延伸引物是(T)₁₃AGAGACTATCCAAGTGCATCAC；

所述FTO基因rs8050136位点的延伸引物是(T)₂₂TTGCCCACTGTGGCAAT；

所述LEPR基因rs1137100位点的延伸引物是(T)₂₃TGCAGACAACATTGAAGGAA；

所述APOE基因rs429358位点的延伸引物是(T)₃₀CGGACATGGAGGACGTG；

所述APOE基因rs7412位点的延伸引物序列是(T)₃₄CCGATGACCTGCAGAAG；

所述MC4R基因rs17782313位点的延伸引物是(T)₃₃TAAAGCAGGAGAGATTGTATCC；

所述UCP2基因rs660339位点的延伸引物是(T)₄₃CCAGTGCGCGCTACAG；

所述ADRB3基因rs4994位点的延伸引物是(T)₄₄GTCTGGAGTCTCGGAGTCC；

所述PPARγ2基因rs1801282位点的延伸引物是(T)₄₆CTGGGAGATTCTCCTATTGAC；

所述GNPDA2基因rs10938397位点的延伸引物是(T)₄₉TGCTAAGAACATTCTTGAAAAC；

所述KCTD15基因rs29941位点的延伸引物是(T)₅₅TGACCTCTGCAGACCTAGGA；

所述NEGR1基因rs3101336位点的延伸引物是(T)₅₆AAGAAAGCAATGACTGAACTTAG。