[发明专利]一种抗原致敏的树突状细胞的制备方法

权利要求书

1.一种用于抗原致敏的树突状细胞制备的培养基，其特征在于：其由基础培养基和其它成分组成。

2.根据权利要求1所述的培养基，其特征在于：所述其它成分可以在使用前通过一定工艺方便地与基础培养基混合成为培养基，用于树突状细胞培养；所述基础培养基包括但不限于RPMI1640培养基、DMEM培养基等。

3.根据权利要求1至2中任意一项所述的培养基，其特征在于：所述其他成分包含药用级人白蛋白、重组人胰岛素、重组人纤连蛋白、亲脂性铁鳌合剂、柠檬酸铁、脂质、微量元素、激素、剪切力保护剂、CP-64131和重组人白细胞介素4(rhIL-4)。

4.根据权利要求1至3中任意一项所述的培养基，其特征在于：所述其它成分包含以终浓度计50-200mg/L药用级人白蛋白、10-100mg/L重组人胰岛素、50-500mg/L重组人纤连蛋白、500-5000mg/L亲脂性铁鳌合剂、500-2000mg/L柠檬酸铁、10-100mg/L脂质、1.5-50mg/L微量元素、10-100mg/L激素、500-3000mg/L剪切力保护剂、0.01-100mg/LCP-64131、50-5000IU/ml重组人白细胞介素4(rhIL-4)。

5.根据权利要求1至4中任意一项所述的培养基，其特征在于：所述其它成分优选包含以终浓度计100-200mg/L药用级人白蛋白、30-80mg/L重组人胰岛素、100-200mg/L重组人纤连蛋白、100-2000mg/L亲脂性铁鳌合剂、100-1500mg/L柠檬酸铁、20-80mg/L脂质、2-30mg/L微量元素、20-50mg/L激素、1000-2000mg/L剪切力保护剂、0.1-10mg/LCP-64131、100-2000IU/mlrhIL-4。

6.根据权利要求1至4中任意一项所述的培养基，其特征在于：所述其它成分更优选包含以终浓度计100mg/L药用级人白蛋白、100mg/L重组人胰岛素、100mg/L重组人纤连蛋白、1500mg/L亲脂性铁鳌合剂、1000mg/L柠檬酸铁、40mg/L脂质、5mg/L微量元素、30mg/L激素、1500mg/L剪切力保护剂、0.5mg/LCP-64131、200IU/mlrhIL-4。

7.根据权利要求1至6中任意一项所述的培养基，其特征在于：所述亲脂性铁螯合剂包含但不限于甘氨酰甘氨酸(glycylglycine，GG)、亚氨基二乙酸(iminodiaceticacid，IDA)、二羟乙基甘氨酸(dihydroxyethylglycine，DHEG)、乙醇胺(ethanolamine)、N-二甲基乙酰替苯胺亚氨基二醋酸(N-(2-hydroxyethyl)imnimodiaceticacid，HIDA)、乙二胺四乙酸(ethylenediaminetetraaceticacid，EDTA)等；所述脂质包含但不限于花生四烯酸、胆固醇、油酸、亚油酸、硫辛酸、亚麻酸等；所述微量元素包含但不限于铁、铜、锌、硒、钴、镍、锰等；所述激素包含但不限于地塞米松、孕酮、胆固醇等；所述剪切力保护剂包含但不限于泊洛沙姆等。

8.一种利用权利要求1至7中任意一项所述的本发明的培养基制备抗原致敏的树突状细胞的方法。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于：其采用密度梯度离心法分离外周血中单个核细胞，经本发明的培养基培养和诱导，得到未成熟树突状细胞；利用高静水压制备具有强免疫原性肿瘤抗原，联合黄芪多糖作为免疫佐剂，对未成熟树突状细胞进行抗原致敏，获得抗原致敏的树突状细胞。