[发明专利]RRM1基因表达量荧光定量PCR检测试剂盒及其应用

权利要求书

1.检测人RRM1基因突变的荧光定量PCR试剂盒，主要包括特异性引物和PCR反应试剂；其特征在于所述特异性引物序列如下：

上游引物：5’-CAAGGCTTGTACAGTGGGGT-3’

下游引物：5’-CCATGGGAGAGTGTTTGCCA-3’。

2.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于所述试剂盒还包括人RRM1基因检测标准品，所述标准品序列如下：

5’-CAAGGCTTGTACAGTGGGGTCACCACAGTGGAACTAGATACTTTGGCTGCTGAAACAGCTGCAACCTTGACTACTAAGCACCCTGACTATGCTATCCTGGCAGCCAGGATCGCTGTCTCTAACTTGCACAAAGAAACAAAGAAAGTGTTCAGTGATGTGATGGAAGACCTCTATAACTACATAAATCCACATAATGGCAAACACTCTCCCATGGTGG-3’。

3.权利要求1所述的试剂盒在检测人RRM1基因表达量中的应用。

4.如权利要求3所述的应用，其特征在于所述应用方法如下：

(1)采集待测样本，提取RNA；

(2)以样品RNA为模板，进行反转录反应，得到样品cDNA；

(3)以梯度浓度的人RRM1基因检测标准品为模板，加入所述特异性引物和PCR反应试剂，组成PCR反应体系，进行PCR扩增，绘制标准曲线；

(4)以样品cDNA为模板，加入所述特异性引物和PCR反应试剂，组成PCR反应体系，进行PCR扩增，扩增结果对照标准曲线，获得RRM1基因表达量。

5.如权利要求4所述的应用，其特征在于所述PCR反应条件如下：95℃预变性2min；95℃变性15s、60℃退火20s、72℃延伸20s，40个循环。