[发明专利]PICT-1蛋白截短突变体及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及生物医学领域，具体的，本发明涉及PICT-1蛋白截短突变体及其应用，更具体的，本发明涉及一种PICT-1蛋白截短突变体、PICT-1蛋白截短突变体的用途、截短突变体编码核酸，截短突变体编码核酸的用途，截短突变体编码核酸的表达载体、一种包含表达载体的宿主细胞、一种治疗神经胶质瘤的方法及装置。

背景技术

神经胶质瘤起源于脑部神经胶质细胞，是成人中尤其青壮年最常见的原发性脑肿瘤，占颅内原发肿瘤比例的40-50％。

在人神经胶质瘤中，19号染色体长臂上一段150kb的片段(19q13.32)经常存在等位缺失现象。这说明在这段染色体上可能存在有肿瘤抑制基因，这些基因的缺失可导致人类神经胶质瘤的发生。2000年，利用缺失定位、cDNA选择、外显子扩增和基因测序等方法，证明在这段序列中存在一个新的基因，命名为GLTSCR2(Homosapiensgliomatumorsuppressorcandidateregiongene2)。2004年，为了寻找与抑癌因子PTEN(phosphataseandtensinhomologdeletedonchromosometen)相互作用的蛋白，Okahara等人使用PTEN的C末端作为诱饵蛋白，用酵母双杂交技术筛选脑部的cDNA文库，筛选出了一个与PTEN的C末端相结合的蛋白，将其命名为PICT-1(proteininteractingwithcarboxylterminus1)，进一步分析发现这个蛋白的编码基因就是GLTSCR2。PICT-1在包括神经胶质瘤、滤泡性癌和卵巢癌等在内的人类多种肿瘤中被发现表达异常，其表达水平与肿瘤的恶性程度呈负相关关系，即PICT-1表达水平越低，肿瘤恶性程度越高，因此PICT-1被认为是一个肿瘤抑制蛋白。但其抑癌功能和分子机制还远没有清楚。

发明内容

本发明旨在至少在一定程度上解决上述技术问题之一或至少提供一种商业选择。

发明人研究发现一种未见报道过的PICT-1蛋白抑癌的分子机制：PICT-1蛋白过表达能够抑制细胞核糖体rDNA的转录，促进细胞自噬的发生，促进肿瘤细胞死亡。进一步的，发明人发现一种PICT-1蛋白截短突变体，其基于一样的分子机制与PICT-1蛋白具有相同的引起细胞自噬，进而抑制癌细胞的生长和增殖，特别是神经胶质瘤细胞的生长和增殖，促进肿瘤细胞死亡的功能。

依据本发明的第一方面，本发明提供一种PICT-1蛋白截短突变体，其具有如SEQIDNO：1中的第181位到第478位所示的序列。SEQIDNO：1为PICT-1蛋白序列。根据本发明的实施例，表示该截短突变体为PICT-1(aa181-479)。

发明人研究发现，PICT-1蛋白过表达或者上述截短突变体过表达，能调控上游结合因子(UBF)的磷酸化和活性，进而抑制rDNA的转录；而且，该蛋白或者截短突变体过表达，会显著抑制Akt/mTOR/p70S6K信号通路的活化。

依据本发明的第二方面，本发明提供上述截短突变体在调节UBF活性、和/或抑制rDNA转录、和/或引起细胞自噬、和/或制备抗肿瘤药物中的用途。

根据本发明的实施例，发明人对神经胶质瘤进行体外研究，发现PICT-1蛋白或者其截短突变体过表达可以通过rRNA转录抑制和Akt/mTOR/p70S6K信号通路失活引起神经胶质瘤细胞发生促死亡型自噬反应，进而抑制神经胶质瘤的生长。根据本发明的实施例，所述引起细胞自噬为引起神经胶质瘤细胞自噬，所述制备抗肿瘤药物为制备抗神经胶质瘤药物。所称的“过表达”指表达过度，即基因被过度的转录、翻译，最终基因表达产物、蛋白或者多肽超出正常水平。

依据本发明的第三方面，本发明提供一种编码上述截短突变体的核酸，其具有如SEQIDNO：2中的第541位到第1437位所示的序列。SEQIDNO：2为编码PICT-1蛋白的核酸序列，为GLTSCR2基因。

发明人研究发现，GLTSCR2基因过表达或者上述截短突变体编码核酸过表达，使得PICT-1蛋白或者所称的PICT-1蛋白截短突变体表达过量，能调控上游结合因子(UBF)的磷酸化和活性，进而抑制rDNA的转录；而且，该基因或者编码所述截短突变体的核酸过表达，即使得PICT-1蛋白或者PICT-1蛋白截短突变体表达过度，会显著抑制Akt/mTOR/p70S6K信号通路的活化。