[发明专利]一种检验棉拭子及其制备方法和检验方法

权利要求书

1.一种检验棉拭子，其特征在于，其包括棉拭子柄和棉拭子头，所述棉拭子头浸入抗生素后插入固体培养基中在棉拭子头表面形成固体培养基层。

2.根据权利要求1所述的检验棉拭子，其特征在于，所述抗生素恩诺沙星，盐霉素、恩拉霉素、泰乐菌素沃尼妙林、氟洛芬、阿莫西林、氟苯尼考、头孢噻呋、土霉素、金霉素、盐霉素、莫能霉素中的一种或两种以上复合；或者是四环素、呋喃唑哃、庆大霉素、青霉素重量份、氨苄青霉素、苯唑青霉素、头孢氨苄、头孢唑啉、头孢拉定、头孢呋辛、头孢曲松、头孢噻肟、头孢哌酮、链霉素、庆大霉素、霉卡那素、丁胺卡那霉素、红霉素、阿奇霉素、克拉霉素、罗它霉素、地红霉素、麦迪霉素、螺旋霉素、交沙霉素、氯霉素、琥珀氯霉素、林可霉素、克林霉素、磺胺嘧啶、复方新诺明、氟哌酸、氧氟沙星、环丙沙星中的一种或两种复合。

3.根据权利要求1所述的检验棉拭子，其特征在于，所述固体培养基包括蛋白胨20-30重量份、玉米淀粉10-20重量份、葡萄糖1-5重量份、丙酮酸钠0.1-2重量份、半胱氨酸盐酸盐0.05-1重量份、硫酸镁0.1-0.5重量份、丙磺酸半钠盐5-15重量份、磷酸氢二钠8-15重量份、特异显色剂0.0002-0.0005重量份、细菌加速生长刺激因子0.05-0.2重量份、抑菌剂0.005-0.02重量份、琼脂12-18重量份；还包括浓度为2-20mg/L的细菌生长指示剂。

4.根据权利要求1所述的检验棉拭子，其特征在于，所述固体培养基中包括蛋白胨25重量份、玉米淀粉14重量份、葡萄糖2.5重量份、丙酮酸钠1.0重量份、半胱氨酸盐酸盐0.1重量份、硫酸镁0.3重量份、丙磺酸半钠盐11重量份、磷酸氢二钠10.7重量份、特异显色剂0.0005重量份、细菌加速生长刺激因子0.1重量份、抑菌剂0.01重量份、琼脂15.2重量份；还包括浓度为2-20mg/L细菌生长指示剂。

5.根据权利要求4所述的检验棉拭子，其特征在于，所述固体培养基的pH为7-8。

6.一种如权利要求1-5任一项所述的检验棉拭子的制备方法，其特征在于，该制备方法包括以下步骤：

1)制备抗生素-药敏检验棉拭子：将抗生素配制成溶液，用0.1-0.5μm滤器过滤，制得抗生素液，然后在无菌条件下将由高压灭菌的棉拭子的棉拭子头插入到上述抗生素液中；

2)浸培养基：将固体培养基中加入双蒸水混合，然后高压灭菌，待培养基降温至50-60℃时，转入到EP离心管中，将步骤1)制备的抗生素-药敏检验棉拭子的棉拭子头插入到培养基中1-3秒，取出并放置于无菌培养皿中冷却，避免棉拭子头与培养皿壁接触；即得到检验棉拭子。

7.利用权利要求1-5任一项所述的检验棉拭子检验鱼病细菌药敏性的方法，其特征在于，该方法步骤如下：

1)制备样本溶液：无菌条件下，使用医用无菌棉拭子从病鱼的细菌感染目标组织取样，置于装有灭菌PBS的EP管中，混合均匀，得样本溶液；

2)无菌条件下，用无菌滴管吸取样本溶液，滴1滴样本溶液到上述检验棉拭子上，静置30-60秒，然后插入高压灭菌过的凝胶液中10-15秒，取出粘有凝胶液的棉拭子，将其浸入高压灭菌过的固化液中10-20秒，将其放入37℃培养12-14小时；根据子细菌生长菌落的生长状况确定细菌对药物的敏感性。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述凝胶液由胶体、生理盐水和抑菌剂组成，其中胶体浓度为7-20g/L，抑菌剂的浓度为0.01g/L；所述固化液由固化剂、抑菌剂以及生理盐水组成，其中，固化剂的的浓度为10-20g/L，抑菌剂的浓度为0.01g/L。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述凝胶为海藻酸钠、果胶、卡拉胶中的一种。

10.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述固化剂为硼砂、含有钙离子或镁离子的溶液中的一种。