[发明专利]一种酶法水解蜗牛蛋白制备生物活性肽的方法

说明书

技术领域

本发明涉及蛋白质水解技术领域，具体涉及一种酶法水解蜗牛蛋白制备生物活性肽的方法。

背景技术

生物活性肽是指对生物机体的生命活动有益或具有生理功能的肽类化合物。与蛋白质相比，活性肽具有良好的加工性能，如良好的溶解性和水合性、粘度低、发泡性低。活性肽的生物利用率高，比氨基酸更易吸收，具有调节人体生理机能的功效，是原蛋白质及其组成氨基酸所不具备的。活性肽的生物学功能有免疫调节、抗高血压、抑菌、抗癌、抗氧化、改善元素吸收、调节食品风味、口味和硬度等。因此被广泛应用于食品、保健品和化妆品中。

近年来，世界各国已经从各种乳蛋白、大豆蛋白、玉米蛋白、鱼贝类蛋白、胶原蛋白等食物蛋白中提取和分离得到多种生物活性肽。其中一些已作为保健食品和药物实现了工业化生产，并取得巨大的经济效益。活性肽类食品、保健品和化妆品在日本、美国、欧洲已上市，其中日本在活性肽生产方面走在世界前列。而我国对活性肽的研究起步较晚，产品并不多见。因此，充分利用我国丰富的蛋白质资源，开发具有良好生物活性的肽类产品，具有非常广泛的市场和应用前景。

蜗牛属腹足纲陆生软体动物，被视为“肉中黄金”，高蛋白、低脂肪、零胆固醇、多种维生素、10多种微量元素和20多种氨基酸，具有很高的食用和药用价值。另外蜗牛分泌的粘液中主要含有胶原蛋白、尿囊素、硫酸软骨素、维生素、天然抗菌肽等活性成分，可修复肌肤、增加皮肤营养，使肌肤更加细腻和光滑。

目前对蜗牛产品的应用开发多集中在食品和化妆品领域。由蜗牛蛋白水解制备的生物活性肽，与植物来源的产品相比，其氨基酸组成和比例与人体氨基酸更为相似。在生产工艺方面，传统的方法多采用酸法水解动植物蛋白，生产工艺较难控制，造成氨基酸一定程度的破坏；而且酸和高温条件往往导致水解液中含有致癌物质，尤其是氯丙醇含量超标，大大限制了产品的使用。本发明采用酶法水解蜗牛蛋白制备生物活性肽，具有反应条件温和、原料有效成分保存完整、产物安全、无有毒有害副产物生成、无氨基酸破坏或消旋现象、无环境污染等优势。

发明内容

本发明的目的在于，提供一种酶法水解蜗牛蛋白制备生物活性肽的方法，充分开发利用我国丰富的优质蛋白质资源，通过体外蛋白酶水解技术释放出具有生物活性的肽类产品，发挥原蛋白质不具备的生理功能。

本发明为实现上述目的所采用的技术方案如下：

一种酶法水解蜗牛蛋白制备生物活性肽的方法，该方法为：将绞碎的蜗牛肉加入适量水，混匀，调节体系的pH值为所用蛋白酶的最适pH值，加入蛋白酶，加热搅拌，进行酶解，酶解结束后进行灭酶处理制得酶解液；将前述制得的酶解液进行过滤，得到的滤液经脱色、浓缩、干燥处理，制得所述生物活性肽产品。具体包括如下步骤：

(1)绞碎：将已去壳去杂的新鲜蜗牛肉或解冻后的冷冻蜗牛肉，用水清洗，沥干多余的水分，置于绞肉机中绞碎，呈肉糜状。

(2)酶解：将绞碎后的蜗牛肉按照一定的固液比加水，搅拌均匀，调节体系pH值为所用酶的最适pH值，加入酶，并加热搅拌，进行酶解。酶解结束后，酶解液煮沸5-10min灭酶。

(3)过滤：将酶解液置于离心机中4000-8000r/min离心5-20min，去除未水解的蜗牛肉碎片，收集上清液。然后向上清液中加入硅藻土，过滤，以除去酶解液中悬浮的大分子物质，得到澄清的滤液。

(4)脱色：向滤液中加入活性炭，搅拌脱色，过滤得无色、无味、透明状液体。

(5)浓缩：脱色后的液体浓缩去除大部分水分。

(6)干燥：浓缩后的粘稠状液体经干燥得到粉状生物活性肽产品。

步骤(2)所述的加水的固液比为1:3-1:10，即蜗牛肉的质量：水的质量为1:3-1:10。优选1:4-1:6。

步骤(2)所述的酶为蛋白酶，可以是酸性蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰酶、风味蛋白酶、菠萝蛋白酶等中的一种或几种酶的复合酶；所述的酶的最适pH值为：酸性蛋白酶3.0-5.0，碱性蛋白酶8.0-11.5，中性蛋白酶6.5-7.5，木瓜蛋白酶5.0-7.0、胰蛋白酶7.0-8.5、风味蛋白酶6.5-7.5、菠萝蛋白酶6.0-8.0。

步骤(2)所述的酶的添加量为蜗牛肉质量的0.1-3％，优选1-2％。

步骤(2)所述的酶解时间为0.5-4h，优选2-3h；所述蛋白酶的酶解温度为40-60℃，优选50℃。

步骤(3)所述的硅藻土的添加量为液体体积的0.5-2w/v％，优选1％。