[发明专利]一种基于香豆素树状体的荧光免疫层析条及其制备方法和用途在审
| 申请号： | 201510680926.4 | 申请日： | 2015-10-19 |
| 公开（公告）号： | CN105259352A | 公开（公告）日： | 2016-01-20 |
| 发明（设计）人： | 吕宏亮;张澍 | 申请（专利权）人： | 山西隆克尔生物制药有限公司;吕宏亮;张澍 |
| 主分类号： | G01N33/577 | 分类号： | G01N33/577;G01N33/569;G01N33/558 |
| 代理公司： | 北京科龙寰宇知识产权代理有限责任公司 11139 | 代理人： | 孙皓晨;马鑫 |
| 地址： | 030801 山西*** | 国省代码： | 山西;14 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 基于 香豆素 树状 荧光 免疫 层析 及其 制备 方法 用途 | ||
1.一种基于香豆素树状体的荧光免疫层析条，其特征在于，所述层析条按照连接顺序依次包括样品衬垫，结合衬垫，醋酸纤维素膜，吸水纸及位于下方的作为组装平台使用的PVC底板，所述醋酸纤维素膜与结合衬垫之间有搭接，所述结合衬垫吸附有表面吸附甲型流感病毒核蛋白单抗以及香豆素树状体的乳胶圆珠；
其中，所述的醋酸纤维素膜上有羊抗鼠IgG多克隆抗体包被的质控线，以及甲型流感病毒核蛋白另一单抗包被的检测线，样品衬垫提供了待测样品加入的位置；
其中，所述的香豆素树状体的结构如以下结构式所示：
2.如权利要求1所述的层析条，其特征在于表面吸附甲型流感病毒核蛋白单抗以及香豆素树状体的乳胶圆珠是通过以下方法制备的：
(1)将0.8ml直径20nm的乳胶圆珠用0.8mlpH8.5的0.1M碳酸氢钠溶液以及pH7.4的PBS先后分别洗涤3次，短暂离心，弃上清；
(2)沉淀中加入0.8mlpH8.5的0.1M碳酸氢钠溶液，再加入128μL溶于DMSO的浓度为1mg/mL香豆素树状体溶液，室温摇动1小时，得到结合香豆素树状体的乳胶圆珠；
(3)将结合香豆素树状体的乳胶圆珠用PBS洗涤2次，短暂离心，弃上清，沉淀用0.8ml含1mg/mL的甲型流感病毒核蛋白单抗溶液重悬，4℃孵育1小时；
(4)缓慢加入0.5mL戊二醛溶液，涡旋1分钟，4℃孵育2小时；
(5)用PBS洗涤2次，短暂离心，弃上清，沉淀用1mL0.1％牛血清白蛋白溶液重悬，4℃保存备用。
3.权利要求1或2所述的荧光免疫层析条在制备检测甲型流感病毒试剂中的用途。
4.如权利要求3所述的用途，其特征在于所述的甲型流感病毒包括甲型H1N1、H5N3、H7N1、H7N7以及H9N2流感病毒。
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