[发明专利]一种二萜类化合物及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种二萜类化合物，其特征在于所述的二萜类化合物是以黑果土当归根为原料，经浸膏提取、有机溶剂萃取、硅胶柱层析、高压液相色谱分离得到的，该化合物分子式为C₂₀H₂₈O₂，命名为对映-6,8(14),15-海松三烯酸(ent-pimar-6,8(14),15-trien-19-oicacid)，具有下述结构式：

。

2.一种权利要求1所述的二萜类化合物的制备方法，其特征在于是以黑果土当归根为原料，经浸膏提取、有机溶剂萃取、硅胶柱层析、高压液相色谱分离获得，具体为：

A、浸膏提取：将黑果土当归根晾干粉碎得到0.05~0.15cm粒径大小的颗粒，加入黑果土当归根重量比4~8倍的体积百分浓度80~95%乙醇溶液于65~74℃下回流提取3~5次，每次1~3h，合并提取液，提取液过滤，减压浓缩提取液至比重为1.1~1.3得到浸膏a；

B、有机溶剂萃取：浸膏a中加入重量比2~4倍量的水，依次用与水等体积的石油醚、乙酸乙酯和正丁醇溶剂进行萃取，每种溶剂萃取4~6次，蒸去溶剂分别得到石油醚萃取物b、乙酸乙酯萃取物c和正丁醇萃取物d；

C、硅胶柱层析：将石油醚萃取物b上硅胶柱，装柱硅胶为100~200目，用量为萃取物b重量6~8倍量；用体积比为25:1~0:1的石油醚-乙酸乙酯有机溶剂梯度洗脱，收集梯度洗脱液、浓缩，经TLC监测，合并相同的部分；

D、高效液相色谱分离：将C步骤中以2:1配比的石油醚-乙酸乙酯有机溶剂进行洗脱得到的洗脱液采用半制备高效液相色谱仪分离纯化，即得所述的二萜类化合物对映-6,8(14),15-海松三烯酸(ent-pimar-6,8(14),15-trien-19-oicacid)。

3.根据权利要求2所述的二萜类化合物的制备方法，其特征在于A步骤所述的过滤是经80~120μm的滤纸进行过滤。

4.根据权利要求2所述的二萜类化合物的制备方法，其特征在于A步骤所述的减压浓缩是在50℃以下的温度条件下用旋转蒸发仪进行减压浓缩。

5.根据权利要求2所述的二萜类化合物的制备方法，其特征在于B步骤中所述的蒸去溶剂是采用旋转蒸发仪蒸去溶剂。

6.根据权利要求2所述的二萜类化合物的制备方法，其特征在于C步骤中所述的石油醚-乙酸乙酯有机溶剂的体积配比为25:1、20:1、15:1、10:1、7:1、5:1、2:1和0:1。

7.根据权利要求2所述的二萜类化合物的制备方法，其特征在于D步骤所述的高效液相色谱分离纯化包括以下步骤：

1）将C步骤中以2:1配比的石油醚-乙酸乙酯有机溶剂进行洗脱得到的洗脱液经半制备高效液相色谱仪，以体积配比为80:20的甲醇-水为流动相，流速2.5ml/min，250×10mm，5μm的C18为固定相，紫外检测器检测波长为210nm，每次进样50μL，分别收集6~13min，15~21min，22~29min，32~39min，41~46min的色谱峰，多次累加后蒸干，依次合并相同部分得到5个流分；

2）将步骤1）中的第32~39min色谱峰的流分经半制备高效液相色谱，以体积配比为78:22的甲醇-水为流动相，流速2.5ml/min，250×10mm，5μm的C18为固定相，紫外检测器检测波长为210nm，每次进样50μL，收集42~44min的色谱峰，多次累加后蒸干，得到所述的二萜类化合物对映-6,8(14),15-海松三烯酸(ent-pimar-6,8(14),15-trien-19-oicacid)。

8.一种权利要求1所述的二萜类化合物在制备预防和/或治疗肿瘤药物中的应用。

9.一种权利要求1所述的二萜类化合物在制备预防和/或治疗人肺腺癌、人前列腺癌或人急性髓系白血病药物中的应用。