[发明专利]一种二萜类化合物及其制备方法与应用

说明书

技术领域

本发明属于植物有效成分提取技术领域，具体涉及一种二萜类化合物及其制备方法与应用。

背景技术

楤木属植物(Aralia)全世界共有40余种，主要分布在亚洲和北美，我国有28种，其中20种可供药用，分布几乎遍布全国，资源丰富。该属植物主要以根、根皮入药,有祛风除湿,利尿消肿,活血止痛的作用。用于肝炎，淋巴结肿大，肾炎水肿，糖尿病，白带，胃痛，风湿关节痛，腰腿痛，跌打损伤。对楤木属植物的化学成分及药理研究主要集中在辽东楤木(A.elata(Miq.)Seem.)、黄毛楤木(A.decaisneanaHance.)、棘茎楤木(A.echinocaulisHand.-Mazz.)、龙眼独活(A.fargesiiFranch.)、东北土当归(A.continentalisKitag.)、食用土当归(A.cordataThunb.)等(郑玲玲，裴凌鹏.楤木属植物研究进展[J].中国民族医药杂志,2010,6(6):57-59)。目前从楤木属植物中已分离出二萜、三萜皂苷、脂肪油、有机酸、香豆素、黄酮、聚炔烯、木脂素、甾醇等单体化合物数百种。药理研究表明该属植物有抗炎、抗菌、抗肿瘤、降血糖、调节血脂、保护肝脏及保护心血管等作用。

黑果土当归(AraliadumetorumHand.-Mazz)在云南称“牛角七”，“白九股牛”，“蜜油参”。民间以根入药，入脾、胃二经。中草药，2001，32(9):847-850）报道，该植物有补中益气、托毒外出、消炎的功效，用于淋巴腺炎、慢性化脓性骨髓炎和疖痈等症。目前对黑果土当归植物化学成分以及药理活性的研究报道较少。本发明试图对黑果土当归中二萜类化合物的抗肿瘤作用做进一步深入研究，以期发现其中的细胞毒活性天然产物，为筛选高效、低毒的抗肿瘤药物提供依据。

发明内容

本发明的第一目的是提供一种二萜类化合物；第二目的在于提供所述二萜类化合物的制备方法；第三目的在于提供所述二萜类化合物的应用。

本发明的第一目的是这样实现的，所述的二萜类化合物是以黑果土当归根为原料，经浸膏提取、有机溶剂萃取、硅胶柱层析、高压液相色谱分离得到的，该化合物分子式为C₂₀H₂₈O₂，命名为对映-6,8(14),15-海松三烯酸(ent-pimar-6,8(14),15-trien-19-oicacid)，具有下述结构式：

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本发明的第二目的是这样实现的，是以黑果土当归根为原料，经浸膏提取、有机溶剂萃取、硅胶柱层析、高压液相色谱分离获得，具体为：

A、浸膏提取：将黑果土当归根晾干粉碎得到0.05~0.15cm粒径大小的颗粒，加入黑果土当归根重量比4~8倍的体积百分浓度80~95%乙醇溶液于65~74℃下回流提取3~5次，每次1~3h，合并提取液，提取液过滤，减压浓缩提取液至比重为1.1~1.3得到浸膏a；

B、有机溶剂萃取：浸膏a中加入重量比2~4倍量的水，依次用与水等体积的石油醚、乙酸乙酯和正丁醇溶剂进行萃取，每种溶剂萃取4~6次，蒸去溶剂分别得到石油醚萃取物b、乙酸乙酯萃取物c和正丁醇萃取物d；

C、硅胶柱层析：将石油醚萃取物b上硅胶柱，装柱硅胶为100~200目，用量为萃取物b重量6~8倍量；用体积比为25:1~0:1的石油醚-乙酸乙酯有机溶剂梯度洗脱，收集梯度洗脱液、浓缩，经TLC监测，合并相同的部分；

D、高效液相色谱分离：将C步骤中以2:1配比的石油醚-乙酸乙酯有机溶剂进行洗脱得到的洗脱液采用半制备高效液相色谱仪分离纯化，即得所述的二萜类化合物对映-6,8(14),15-海松三烯酸(ent-pimar-6,8(14),15-trien-19-oicacid)。

本发明二萜类化合物是首次被分离出来的，通过核磁共振和其他波谱技术测定方法确定为二萜类化合物，并表征其具体结构为：