[发明专利]利用高通量分子标记转育甜瓜雌性系的方法及其专用引物有效

专利信息
申请号: 201510691151.0 申请日: 2015-10-22
公开(公告)号: CN105256031B 公开(公告)日: 2019-01-01
发明(设计)人: 许勇;张春秋;史建廷;宫国义;张海英 申请(专利权)人: 北京市农林科学院
主分类号: C12Q1/6895 分类号: C12Q1/6895;C12N15/11;A01H1/02
代理公司: 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 代理人: 关畅;张立娜
地址: 100097 北京市海淀区曙光*** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 利用 通量 分子 标记 甜瓜 雌性 方法 及其 专用 引物
【权利要求书】:

1.用于检测甜瓜性别基因的成套KASP引物,所述甜瓜性别基因为CmACS7基因和CmWIP1基因,其特征在于:所述成套KASP引物由如下(1)和(2)组成:

(1)特异于所述CmACS7基因的KASP引物:引物1、引物2和引物3;所述引物1为核苷酸序列如序列表中序列1所示的单链DNA;所述引物2为核苷酸序列如序列表中序列2所示的单链DNA;所述引物3为核苷酸序列如序列表中序列3所示的单链DNA;

(2)特异于所述CmWIP1基因的KASP引物:引物4、引物5和引物6;所述引物4为核苷酸序列如序列表中序列4所示的单链DNA;所述引物5为核苷酸序列如序列表中序列5所示的单链DNA;所述引物6为核苷酸序列如序列表中序列6所示的单链DNA。

2.用于检测甜瓜性别基因的试剂盒,其特征在于:所述试剂盒含有权利要求1所述的成套KASP引物。

3.根据权利要求2所述的试剂盒,其特征在于:所述试剂盒中还含有荧光探针A、荧光探针B、淬灭探针A和淬灭探针B;

所述荧光探针A的核苷酸序列如序列表中序列1的第1-21位所示,5’末端连接荧光基团A;所述淬灭探针A的核苷酸序列为序列表中序列1的第1-21位所示序列的反向互补序列,3’末端连接淬灭基团;

所述荧光探针B的核苷酸序列如序列表中序列2的第1-21位所示,5’末端连接荧光基团B;所述淬灭探针B的核苷酸序列为序列表中序列2的第1-21位所示序列的反向互补序列,3’末端连接淬灭基团;

所述荧光基团A为FAM;所述荧光基团B为HEX;所述淬灭基团为BHQ。

4.权利要求1所述的成套KASP引物或权利要求2或3所述的试剂盒在如下任一中的应用:

(1)检测或辅助检测甜瓜性别基因的基因型,所述甜瓜性别基因为CmACS7基因和CmWIP1基因;

(2)培育甜瓜雌性系。

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