[发明专利]一种半夏试管微球茎的制备方法

权利要求书

1.一种试管微球茎的制备方法，其特征在于包括如下操作步骤：

1）.将半夏块茎接入培养基中诱导出愈伤组织后，进行继代增殖、芽的分化；

2）.当经过诱导出的半夏组培芽长到有1～3cm长时，选取生长良好的芽，从愈伤组织处切下，使其带有一块愈伤组织，愈伤组织直径3±1mm，将半夏组培芽接入到诱导培养基中，芽留在培养基外面，诱导培养基的6-糖基氨基嘌呤KT浓度为0.8mg/L、萘乙酸NAA浓度为0.8mg/L、糖浓度为3%，诱导培养基的肌醇浓度提高到500mg/L，放入光照条件12h/d，光照时间为12h/d，温度为23—27℃左右的培养室中培养；

3）.将带有愈伤组织的幼芽接入到培养基中后，在前10d愈伤组织继续增大，幼芽也迅速增长，在10—20d中从愈伤组织上不断长出不定根，且愈伤组织不在增殖，表面变得平滑，有绿色的亮泽出现，在20—30d中植株不断成熟，同时，愈伤组织完全变成与半夏块茎外形、结构相似的幼小球茎；

4）、将诱导出与半夏块茎外形相似的幼小球茎从培养基中取出洗净，将微球茎以上的半夏苗切除，保留球茎部分，并将获取的半夏微球放入到质量浓度为0.5%的高锰酸钾溶液中进行消毒5—8min，然后放入到活性炭:滑石粉:多菌灵比例为3:1:0.02的粉末中滚动3-5min，再喷洒6-糖基氨基嘌呤KT浓度为0.1mg/L、萘乙酸NAA浓度为0.1mg/L、赤霉素GA3浓度为0.1mg/L的1/2MS培养溶液，之后重复上述步骤2操作，放入5%的褐藻酸钠溶液中侵泡5—7min取出置于空气中固化10-15min，再将已固化的半夏微球放入0.4%氯化钙溶液中侵泡1-2min取出置于空气中固化后，即可用透气性良好的聚乙烯塑料袋包装、贮藏。