[发明专利]一种修饰的增强型DC-CIK靶向免疫细胞群的制备方法和用途

权利要求书

1.一种用于修饰DC-CIK细胞的慢病毒，其特征在于包含PD-1胞外区及跨膜区序列，核 酸序列如SEQIDNO：1所示。

2.如权利要求1所述的慢病毒，其特征在于该病毒可在感染细胞后表达相应蛋白，其蛋 白序列如SEQIDNO：2所示。

3.制备如权利要求1所述的慢病毒的方法，其特征在于慢病毒是通过以下步骤获得的 ：制备PD-1胞外区及跨膜区序列核酸序列，将所述序列连入商业化慢病毒载体。

4.如权利要求3所述的方法，其特征在于使用pWPXL慢病毒载体，其中包括但不限于该 慢病毒系统，进行载体构建，通过磷酸钙转染的方法，进行病毒包装，收获的病毒经纯化后 备用。

5.制备如权利要求1所述的修饰DC-CIK细胞慢病毒的方法，所述DC-CIK细胞是通过 以下步骤获得的：一种制备DC-CIK细胞的方法，其特征在于，包括以下步骤：从外周血中 分离淋巴细胞，再通过贴壁处理对DC细胞和CIK细胞进行区分，并培养5-6天；将培养5天的 DC细胞与灭活的肿瘤抗原孵育培养，同时将培养5天的CIK细胞加入5x10⁸病毒，共培养12小 时；再将DC细胞与修饰的CIK细胞1:5混合共培养4-5天即可获得Platinum-DC-CIK细胞。

6.如权利要求3-5任一项所述的方法，其中处理个体中包括步骤：用包含根据权利要求 1所述的一种修饰的增强型DC-CIK靶向性免疫细胞群。

7.根据权利要求3-5任一项所述的方法，其中所述个体已经接受或正在接受或将要接 受额外的抗癌疗法，其中额外的抗癌疗法包括手术、放疗、化疗、免疫治疗或激素治疗。

8.如权利要求1-5任一项所述的慢病毒在用于制备肿瘤治疗试剂中的制药用途，优选 的，所述的肿瘤包括但不限于肝癌、胃癌、乳腺癌、结肠癌、宫颈癌、神经胶质瘤和乳腺癌。