[发明专利]一株高产阿魏酸酯酶的枝状枝孢菌及在食醋酿造中的应用

说明书

本发明公开了一株高产阿魏酸酯酶的枝状枝孢菌及在食醋酿造中的应用，属于发酵工程与生物技术领域。本发明的枝状枝孢菌(Cladosporium cladosporioides)，由中国典型培养物保藏中心保藏，保藏编号为CCTCC NO：M 2015549，保藏日期为2015年9月16号。本发明以麦麸为发酵培养基质来发酵生产高活性阿魏酸酯酶，易于实现阿魏酸酯酶的工业化生产。并将阿魏酸酯酶应用于食醋生产中，获得了富含阿魏酸的功能性保健食醋，为保健醋的开发提供新的技术支持。

技术领域

本发明涉及一株高产阿魏酸酯酶的枝状枝孢菌及在食醋酿造中的应用，属于发酵工程与生物技术领域。

背景技术

阿魏酸酯酶(FEA,EC 3.1.1.73)是羧酸酯水解酶的一个亚类，主要生物功能是水解植物细胞壁多糖与阿魏酸(FA)连结的酯键，从而将阿魏酸及其它苯丙烯酸释放出来。目前，报道的产阿魏酸酯酶的菌株约有30株，其中主要包括黑曲霉、米曲霉、土曲霉、黄曲霉、黄柄曲霉、泡盛曲霉、塔宾曲霉、构巢曲霉、宇佐美曲霉、根霉、青霉、嗜热侧孢霉、尖孢镰刀菌、层出镰刀菌、粗糙脉孢菌、米黑根毛霉、柄篮状菌、变绿红菇、杏鲍菇、出芽短梗霉、厌氧真菌、新美丽丝菌等，但是这些菌株产阿魏酸酯酶的活力普遍较低，不足以满足工业应用。也有通过基因改造手段来提高微生物产阿魏酸酯酶能力的相关研究，但是目前构建的工程菌株产量都不是很高，仍达不到工业化生产要求。因此探索酶活高、安全的野生型阿魏酸酯酶产生菌显得很有必要，具有极大的研究和开发价值。

阿魏酸因为具有多种生理活性功能近几年来一直成为人们研究的热点。目前已报道，阿魏酸对过氧化氢、超氧自由基、羟自由基、过氧化亚硝基都有强烈的碎灭作用。阿魏酸可通过对内皮素(Endothelin，ET)的作用，起到降低血压的功效。阿魏酸对感冒病毒、呼吸道合胞体病毒和艾滋病病毒都有显著抑制作。阿魏酸能降低心肌缺血的耗氧量，在临床上已用于治疗冠心病、心绞痛。近年来，有关阿魏酸及其衍生物抑制结肠癌、直肠癌和舌癌的报道在不断增加。而且发现阿魏酸在护肝、治疗糖尿病方面有显著效果。

目前，国外有关阿魏酸的功能性食品的报道在逐渐增多，本发明旨在利用微生物资源将生物废弃资源通过发酵工程技术转化为可利用物质添加到食醋发酵体系中，制得一种富含阿魏酸的功能性保健食醋，加大保健醋的开发。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是：针对目前微生物阿魏酸酯酶活性较低，无法实现工业化应用的问题，提供一株新的高产阿魏酸酯酶的枝状枝孢菌，其可利用小麦麸皮发酵产生阿魏酸酯酶，首次添加到食醋发酵过程中，所制得富含阿魏酸的食醋具有抗氧化、降血压、抗血栓、降血脂、抗菌消炎、预防癌症、护肝、治疗糖尿病等功效。

本发明的第一个目的是提供一株新的高产阿魏酸酯酶的枝状枝孢菌，来源于浙江塔牌绍兴酒有限公司黄酒麦曲，经过筛选，分离纯化得到的。该枝状枝孢菌(Cladosporiumcladosporioides)，由中国典型培养物保藏中心保藏，简称CCTCC，保藏编号为CCTCC NO:M2015549，保藏日期2015年9月16号，保藏地址为中国武汉武汉大学。

本发明所得枝状枝孢菌的平板观察特征如下：在PDA固体培养基上培养72h，菌株菌落厚，呈厚绒毛状，与培养基结合紧密，不易挑起。颜色初为烟褐色至绿褐色，后期为黑褐色至黑色。菌落背面黑色。

所述枝状枝孢菌的rDNA ITS1-5.8S-ITS2序列与Cladosporium cladosporioidesstrain FR5-SAR1同一性达到100％。

本发明的第二个目的是提供所述枝孢霉在生产阿魏酸酯酶方面的应用。

所述生产阿魏酸酯酶是以麦麸作为培养基的主要成分。