[发明专利]核酸扩增反应装置和核酸检测方法

权利要求书

1.一种核酸扩增反应装置，包括：

安装部，可安装填充有核酸扩增反应液和与所述核酸扩增反应液相 比比重小且不与所述核酸扩增反应液混和的液体的核酸扩增反应容器；

第1温度调整部，对所述核酸扩增反应容器的第1区域的温度进行 调整；

第2温度调整部，对所述核酸扩增反应容器的第2区域的温度进行 调整；和，

驱动机构，对第1配置和第2配置进行切换，其中，所述第1配置 为所述第1区域在重力作用的方向上位于所述第2区域的下方，所述第 2配置为所述第2区域在重力作用的方向上位于所述第1区域的下方；

所述核酸扩增反应液含有用于使第1核酸扩增的第1引物对和用于 使第2核酸扩增的第2引物对，且所述第1引物对的对所述第1核酸的 能够退火的温度区域与所述第2引物对的对所述第2核酸的能够退火的 温度区域的重叠部分为10℃以下，

对于所述核酸扩增反应液，将所述第1区域的温度调整为第1温度， 将所述第2区域的温度调整为低于所述第1温度的第2温度进行第1热 循环后，

将所述第1区域的温度调整为第3温度，将所述第2区域的温度调 整为低于所述第3温度的与所述2温度不同的第4温度进行第2热循环。

2.根据权利要求1所述的核酸扩增反应装置，其中，所述第2温 度高于所述第4温度。

3.根据权利要求1或2所述的核酸扩增反应装置，其中，所述第2 温度与所述第1引物对和所述第1核酸的最佳退火温度的温度差为5℃ 以内。

4.根据权利要求1～3中任一项所述的核酸扩增反应装置，其中， 所述第2温度与所述第1引物对和所述第1核酸的最佳退火温度的温度 差为1℃以内。

5.根据权利要求1～4中任一项所述的核酸扩增反应装置，其中， 所述第4温度与所述第2引物对和所述第2核酸的最佳退火温度的温度 差为5℃以内。

6.根据权利要求1～5中任一项所述的核酸扩增反应装置，其中， 所述第4温度与所述第2引物对和所述第2核酸的最佳退火温度的温度 差为1℃以内。

7.根据权利要求1～6中任一项所述的核酸扩增反应装置，其中， 所述第1热循环为重复所述第1温度和所述第2温度的2阶段的温度变 化的热循环，

在所述第2温度下，所述第1核酸扩增，所述第2核酸不扩增。

8.根据权利要求1～7中任一项所述的核酸扩增反应装置，其中， 所述第2热循环为重复所述第3温度和所述第4温度的2阶段的温度变 化的热循环，

在所述第4温度下，所述第2核酸扩增，所述第1核酸不扩增。

9.一种核酸检测方法，使用如下核酸扩增反应装置，

所述核酸扩增反应装置包含：

安装部，可安装填充有核酸扩增反应液和与所述核酸扩增反应液相 比比重小且不与所述核酸扩增反应液混和的液体的核酸扩增反应容器；

第1温度调整部，对所述核酸扩增反应容器的第1区域的温度进行 调整；

第2温度调整部，对所述核酸扩增反应容器的第2区域的温度进行 调整；和

驱动机构，对第1配置和第2配置进行切换，其中，所述第1配置 为所述第1区域在重力作用的方向上位于所述第2区域的下方，所述第 2配置为第2区域在重力作用的方向上位于所述第1区域的下方；

所述核酸检测方法包含如下工序：

对如下的核酸扩增反应液将所述第1区域设定为第1温度，将所述 第2区域设定为低于所述第1温度的第2温度而进行第1热循环的工序； 和

在所述第1热循环后，将所述第1区域设定为第3温度，将所述第 2区域设定为低于所述第3温度的与所述第2温度不同的第4温度而进 行第2热循环的工序；

所述核酸扩增反应液含有用于使第1核酸扩增的第1引物对和用于 使第2核酸扩增的第2引物对，且所述第1引物对的对所述第1核酸的 能够退火的温度区域与所述第2引物对的对所述第2核酸的能够退火的 温度区域的重叠部分为规定的温度以下。