[发明专利]一种培养基及其应用、培养方法有效
| 申请号： | 201510719086.8 | 申请日： | 2015-10-28 |
| 公开（公告）号： | CN105154402B | 公开（公告）日： | 2018-09-21 |
| 发明（设计）人： | 陈海佳;王一飞;葛啸虎;万桦 | 申请（专利权）人： | 广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/0783 | 分类号： | C12N5/0783 |
| 代理公司： | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人： | 赵青朵 |
| 地址： | 510000 广东省广州市国*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 培养基 及其 应用 培养 方法 | ||
1.一种CD19-CAR-T细胞培养基，其特征在于，由转铁蛋白、重组人胰岛素、孕酮、胎牛血清、干细胞生长因子、维生素C、白介素2、白介素4、硫酸锌和DMEM/F12培养基组成；
所述CD19-CAR-T细胞培养基以1L计算，各组分的含量为：
2.如权利要求1所述的培养基在促进CD19-CAR-T细胞增殖、延长细胞培养时间、保持表达表面标志物中的应用。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述表面标志物为CD4+、CD8+或CD19CAR中的一种或几种。
4.一种CD19-CAR-T细胞的培养方法，其特征在于，采用如权利要求1所述培养基培养CD19-CAR-T细胞。
5.根据权利要求4所述的培养方法，其特征在于，包括如下步骤：
步骤1：将CD19-CAR-T细胞和CD3单克隆抗体加入如权利要求1所述培养基中，调整细胞密度，进行细胞培养，培养72小时后补加所述培养基和所述CD3单克隆抗体；
步骤2：继续培养至少4天，每隔2～3天补充所述培养基。
6.根据权利要求5所述的培养方法，其特征在于，所述细胞密度为(1～10)×106cell/mL。
7.根据权利要求5所述的培养方法，其特征在于，所述细胞培养的条件为5％CO2、37℃。
8.根据权利要求5所述的培养方法，其特征在于，所述CD3单克隆抗体的浓度为20～50ng/mL。
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