[发明专利]一种用于组织培养红叶黄连木的培养基、应用及培养方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种培养基、应用及培养方法，具体涉及利用组培技术生产红叶黄连木种苗的培养基、应用及其培养方法。

背景技术

红叶黄连木又名楷树、楷木、黄楝树等，属漆树科黄连木属落叶乔木，成年树高达20m以上，材质优良，叶片随季节变换而呈现不同色泽，花序红色，极为美观，宜作景观绿化，是一种多用途树种。因其种子含油率42.5％，出油率20％～30％，可提炼成生物柴油。近年来，红叶黄连木被国家列为“十一五”期间重点开发的主要生物质能源树种之一，极具发展潜力。

目前，红叶黄连木主要通过播种和嫁接繁殖，但出芽率和成活率都不是很高，远不能满足国内对种苗的需求。

发明内容

有鉴于此，本发明提供一种适用于组织培养红叶黄连木的培养基、应用及培养方法，其可以有效的提高红叶黄连木的出芽率、成活率，并且在保持优良树种的遗传稳定性的同时，有效提高其繁殖系数。

为解决以上技术问题，本发明的技术方案提供的第一方面的技术方案为一种适用于组织培养红叶黄连木的培养基，所述培养基分为初代培养基、增殖培养基和生根培养基；

所述初代培养基由以下组分组成：MS、0.5-1.5mg/L6-苄基腺嘌呤、0.005-0.015mg/L萘乙酸、0.5-1.5g/L聚乙烯吡咯烷酮、15-25g/L蔗糖、5.5-6.5g/L琼脂；

所述增殖培养基组分由以下组分组成：MS、1.5-2.5mg/L6-苄基腺嘌呤、0.05-0.15mg/L萘乙酸、15-25g/L蔗糖、5.5-6.5g/L琼脂；

所述生根培养基组分由以下组分组成：1/2MS、0.15-0.25mg/L萘乙酸、0.75-0.85mg/L3-吲哚丁酸、15-25g/L蔗糖、5.5-6.5g/L琼脂、0.15-0.25mg/L活性炭；

所述初代培养基灭菌前pH调至5.5-6.5；所述增殖培养基灭菌前pH调至5.5-6.5；所述生根培养基灭菌前pH调至5.5-6.0。

优选的，所述初代培养基由以下组分组成：MS、1mg/L6-苄基腺嘌呤、0.01mg/L萘乙酸、1g/L聚乙烯吡咯烷酮、20g/L蔗糖、6g/L琼脂。

优选的，所述增殖培养基由以下组分组成：MS、2mg/L6-苄基腺嘌呤、0.1mg/L萘乙酸、20g/L蔗糖、6g/L琼脂。

优选的，所述生根培养基由以下组分组成：1/2MS、0.2mg/L萘乙酸、0.8mg/L3-吲哚丁酸、20g/L蔗糖、6g/L琼脂、0.2mg/L活性炭。

优选的，所述初代培养基灭菌前pH调至6.0；所述增殖培养基灭菌前pH调至6.0，所述生根培养基灭菌前pH调至6.0。

本申请还提供第二方面的技术方案为前述任一所述的培养基在组织培养红叶黄连木上的应用。

本申请还提供第三方面的技术方案为一种组织培养红叶黄连木的培养方法，所述培养方法包括以下步骤：

A、采集一年生半木质化的红叶黄连木的植物组织，先用洗涤剂溶液浸泡15-25min，刷洗腋芽部位后放在流水下冲洗过夜；在无菌的操作台上，先用75％酒精处理20-40s，用无菌水清洗，再用0.1％的升汞处理8-12min，再用无菌水清洗，晾干得培养材料；

B、将A步骤得到的培养材料接种到前述任一所述的初代培养基上，然后将所得培养基在光照培养条件下进行初代培养得分化出的芽；

C、将B步骤所得初代培养分化出的芽，在无菌操作台上切取下来，放在前述任一所述的增殖培养基上进行丛生芽诱导；

D、将红叶黄连木增殖的丛生芽分离成单株，将其接种到前述任一所述的生根培养基上，然后将所得培养基在光照培养条件下进行培养。

优选的，所述B步骤中光照培养的条件为温度为25±2℃，光照2500Lx，光照时间12h/d。

优选的，所述D步骤中光照培养的条件为温度为25±2℃，光照2500Lx，光照时间12h/d。

优选的，所述A步骤中植物组织为顶芽或腋芽茎段。

优选的，所述A步骤中无菌水清洗次数为3-7次。

本申请提供的主要技术方案即为用于组织培养红叶黄连木的培养基，该培养基设置为初代培养基、增殖培养基和生根培养基，三者采用特定的组培配方，从而有效用于红叶黄连木的组织培养，有效的提高红叶黄连木的出芽率、成活率，并且在保持优良树种的遗传稳定性的同时，有效提高其繁殖系数。