[发明专利]一种检测骨髓瘤相关标志物的探针组合及其试剂盒有效
申请号: | 201510733142.3 | 申请日: | 2015-10-30 |
公开(公告)号: | CN106636078B | 公开(公告)日: | 2019-12-24 |
发明(设计)人: | 刘苏燕;吴诗扬;董艳 | 申请(专利权)人: | 益善生物技术股份有限公司 |
主分类号: | C12N15/11 | 分类号: | C12N15/11;C12Q1/6886 |
代理公司: | 11227 北京集佳知识产权代理有限公司 | 代理人: | 赵青朵 |
地址: | 510663 广东省广州市科*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 标志物 骨髓瘤 试剂盒 探针组合物 分子生物学领域 信号放大探针 准确度 捕获探针 目标标志 探针组合 原位杂交 准确检测 灵敏度 种检测 检测 级联 生物技术 放大 医学 | ||
1.一种探针组合物,其特征在于,所述探针组合物能够检测骨髓瘤相关标志物,所述标志物为hsa-miR-34a-5p;
或者,所述标志物为hsa-miR-34a-5p以及如下标志物中的至少一种:hsa-miR-20a-5p、hsa-miR-15a-5p、hsa-miR-16-5p、hsa-miR-135b-5p、hsa-miR-29a-3p、hsa-miR-29b-3p、hsa-miR-29c-3p、hsa-miR-34b-5p、hsa-let-7e-5p或hsa-miR-21-5p;
所述探针组合物包括捕获探针:
所述捕获探针的核苷酸序列自5’端至3’端依次为P1序列、间隔臂序列、P2序列;
所述P1序列与上述的标志物特异性结合;
所述间隔臂序列为5个~10个T;
所述P1序列选自SEQ ID NO:1~11,所述P2序列选自SEQ ID NO:12~23。
2.根据权利要求1所述的探针组合物,其特征在于,所述捕获探针选自以下序列:
自5’端至3’端顺序连接的SEQ ID NO:1、5个T、SEQ ID NO:12;
自5’端至3’端顺序连接的SEQ ID NO:2、5个T、SEQ ID NO:13;
自5’端至3’端顺序连接的SEQ ID NO:3、5个T、SEQ ID NO:14;
自5’端至3’端顺序连接的SEQ ID NO:4、5个T、SEQ ID NO:15;
自5’端至3’端顺序连接的SEQ ID NO:5、5个T、SEQ ID NO:16;
自5’端至3’端顺序连接的SEQ ID NO:6、5个T、SEQ ID NO:17;
自5’端至3’端顺序连接的SEQ ID NO:7、5个T、SEQ ID NO:18;
自5’端至3’端顺序连接的SEQ ID NO:8、5个T、SEQ ID NO:19;
自5’端至3’端顺序连接的SEQ ID NO:9、5个T、SEQ ID NO:20;
自5’端至3’端顺序连接的SEQ ID NO:10、5个T、SEQ ID NO:21;
自5’端至3’端顺序连接的SEQ ID NO:11、5个T、SEQ ID NO:22。
3.一种骨髓瘤相关标志物检测试剂盒,其特征在于,包括权利要求1~2任一项所述的捕获探针和信号放大组合物。
4.根据权利要求3所述的试剂盒,其特征在于,所述信号放大组合物为:
一级信号放大探针,在一级信号放大探针的5’端修饰荧光基团;
或一级信号放大探针,二级信号放大探针,在二级信号放大探针的3’端修饰荧光基团;
或一级信号放大探针、二级信号放大探针,三级信号放大探针,在三级信号放大探针的5’端修饰荧光基团;
针对所述捕获探针中的任一种,所述一级信号放大探针与所述捕获探针特异性结合;
针对所述一级信号放大探针中的任一种,所述二级信号放大探针与所述一级信号放大探针特异性结合;
针对所述二级信号放大探针中的任一种,所述三级信号放大探针与所述二级信号放大探针特异性结合。
5.根据权利要求4所述的试剂盒,其特征在于,所述:
一级信号放大探针自5’端至3’端依次为P4序列、间隔臂序列、P3序列;
二级信号放大探针自5’端至3’端依次为P5序列、间隔臂序列、P6序列;
三级信号放大探针自5’端至3’端依次为P8序列、间隔臂序列、P7序列;
所述P3序列与P2序列特异性结合;
所述P5序列与P4序列特异性结合;
所述P6序列与P7序列特异性结合;
所述间隔臂序列独立的为2个~20个T;
所述P8序列为5个T。
6.根据权利要求5所述的试剂盒,其特征在于,所述P4序列选自SEQ ID NO:24~35。
7.根据权利要求6所述的试剂盒,其特征在于,所述P6序列选自SEQ ID NO:48~59。
8.根据权利要求3~7任一所述的试剂盒,其特征在于,所述荧光基团选自FAM、TET、JOE、HEX、Cy3、TAMRA、ROX、Texas Red、LC RED640、Cy5、LC RED705或Alexa Fluor 488,且针对不同捕获探针的信号放大探针上修饰的荧光基团互不相同。
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