[发明专利]一种鼻咽癌microRNA检测试剂盒有效

专利信息
申请号: 201510733248.3 申请日: 2015-10-30
公开(公告)号: CN106636079B 公开(公告)日: 2019-12-24
发明(设计)人: 刘苏燕;吴诗扬;董艳 申请(专利权)人: 益善生物技术股份有限公司
主分类号: C12N15/11 分类号: C12N15/11;C12Q1/6886
代理公司: 11227 北京集佳知识产权代理有限公司 代理人: 杨炳财;屈慧丽
地址: 510663 广东省广州市科*** 国省代码: 广东;44
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摘要:
搜索关键词: 鼻咽癌 检测试剂 探针组合物 假阳性 靶标 分子生物学领域 捕获探针 灵敏度
【权利要求书】:

1.一种探针组合物,其特征在于,所述探针组合物包括:与靶标microRNA结合的捕获探针以及信号放大组合物,所述靶标microRNA选自hsa-miR-17-5p、hsa-miR-20a-5p、hsa-miR-29c-3p、hsa-miR-223-3p、hsa-miR-34b-3p、hsa-miR-34c-5p、hsa-miR-212-3p、hsa-miR-216a-5p、hsa-miR-217、hsa-miR-151a-3p以及hsa-miR-192-5p中的一种或多种;

所述捕获探针的碱基序列从5’端到3’端依次为:与所述靶标microRNA结合的特异性序列P1、第一间隔臂序列、P2序列,所述P1序列为SEQ ID NO.1~SEQ ID NO.11中的任意一条,所述P2序列为SEQ ID NO.12~SEQ ID NO.22中的任意一条,所述第一间隔臂序列为5~10个T;

所述信号放大组合物为第三信号放大组合物,所述第三信号放大组合物为一级信号放大探针、二级信号放大探针和三级信号放大探针,所述第三信号放大组合物的3’端还修饰有第三荧光基团,所述第三荧光基团选自FAM、TET、JOE、HEX、Cy3、TAMRA、ROX、Texas Red、LCRED640、Cy5、LC RED705和Alexa Fluor 488中的任意一种;

所述一级信号放大探针的碱基序列从5’端到3’端依次为:P4序列、第二间隔臂序列、与所述P2序列反向互补结合的P3序列;所述P4序列为SEQ ID NO.24~SEQ ID NO.35中的任意一条,所述第二间隔臂序列为5~10个T。

2.根据权利要求1所述的探针组合物,其特征在于,所述二级信号放大探针的碱基序列从5’端到3’端依次为:P5序列、第三间隔臂序列、P6序列,所述P5序列含有一个或以上与所述P4序列反向互补的碱基序列;所述P5序列为SEQ ID NO.36~SEQ ID NO.47中的任意一条,所述P6序列为SEQ ID NO.48~SEQ ID NO.59中的任意一条,所述第三间隔臂序列为5~10个T。

3.根据权利要求2所述的探针组合物,其特征在于,所述三级信号大探针的碱基序列从5’端到3’端依次为:P8序列、第四间隔臂序列、P7序列,所述P7序列含有一个或以上与所述P5序列反向互补的碱基序列;所述P7序列为SEQ ID NO.60~SEQ ID NO.71中的任意一条,所述P8序列为5个碱基的polyT序列,所述第四间隔臂序列为5~10个T。

4.根据权利要求3所述的探针组合物,其特征在于,所述P1序列、P2序列、P3序列、P4序列、P5序列、P6序列、P7序列和P8序列内部不存在发夹结构。

5.根据权利要求4所述的探针组合物,其特征在于,所述第一间隔臂序列、所述第二间隔臂序列、所述第三间隔臂序列和所述第四间隔臂序列中T的数量可以相同或者不同。

6.根据权利要求5所述的探针组合物,其特征在于,所述第一荧光基团、所述第二荧光基团和所述第三荧光基团相同或者不同。

7.一种鼻咽癌microRNA检测试剂盒,其特征在于,所述鼻咽癌microRNA检测试剂盒包括权利要求1至6中任意一项所述的探针组合物。

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