[发明专利]一种鼻咽癌microRNA检测试剂盒

说明书

本发明属于分子生物学领域，尤其涉及一种鼻咽癌microRNA检测试剂盒，用于解决现有鼻咽癌microRNA检测试剂盒稳定性差、重复性弱、特异性低、容易出现假阳性的问题。本发明提供了一种鼻咽癌microRNA检测试剂盒，包括一种探针组合物，所述探针组合物包括：与靶标microRNA结合的捕获探针以及信号放大组合物，所述靶标microRNA选自hsa‑miR‑17‑5p、hsa‑miR‑20a‑5p、hsa‑miR‑29c‑3p、hsa‑miR‑223‑3p、hsa‑miR‑34b‑3p、hsa‑miR‑34c‑5p、hsa‑miR‑212‑3p、hsa‑miR‑216a‑5p、hsa‑miR‑217、hsa‑miR‑151a‑3p以及hsa‑miR‑192‑5p中的一种或多种。本发明制得的一种鼻咽癌microRNA检测试剂盒具有稳定性好、重复性好、特异性高、不容易出现假阳性以及灵敏度高的优点。

技术领域

本发明属于分子生物学领域，尤其涉及一种鼻咽癌microRNA检测试剂盒。

背景技术

MicroRNAs(miRNAs)是在真核生物中发现的一类内源性的具有调控功能的非编码RNA，其大小长约20～25个核苷酸。成熟的miRNAs是由较长的初级转录物经过一系列核酸酶的剪切加工而产生的，随后组装进RNA诱导的沉默复合体(RNA-induced silencingcomplex,RISC)，通过碱基互补配对的方式识别靶miRNA，并根据互补程度的不同指导沉默复合体降解靶miRNA或者阻遏靶miRNA的翻译。最近的研究表明，miRNA参与各种各样的调节途径，包括发育、病毒防御、造血过程、器官形成、细胞增殖和凋亡、脂肪代谢等等。近年来发现，部分miRNA的异常表达与多种疾病的发生和发展密切相关，如：miRNA的异常表达与鼻咽癌的发生和发展密切相关。研究者采用基因芯片技术，将31份鼻咽癌活检样品与10份正常鼻咽上皮细胞样品对比分析了207个miRNA，结果发现了8个表达差异明显的miRNA，分别是：miR-29c、miR-34b、miR-34c、miR-212、miR-216、miR-217、miR-151和miR-192，其中，在鼻咽癌细胞中，miR-29c表达浓度仅有正常鼻咽上皮细胞的1/5。此外还有研究表明，miR-17-92和miR155在鼻咽癌中为明显的高表达，miR-34家族、miR-143、miR-145则表达下调。

针对鼻咽癌microRNA的检测方法主要有：Northern Blot、基因芯片、荧光定量探针法、基于微球的流式细胞术技术。然而，上述方法存在着敏感度低、耗时长、准确性低、RNA的用量较大、检测费用昂贵、重复性差等缺点。目前。克服了上述缺点的原位杂交技术是一种定位和形态学检测保存的组织切片或细胞制备物中特异性microRNA序列的方法。然而，目前现有的原位杂交技术中，针对鼻咽癌microRNA的多重平行检测所使用的试剂盒仍然存在许多问题，如：稳定性差、重复性弱、特异性低、容易出现假阳性以及灵敏度低的缺点。

因此，研发出一种稳定性好、重复性好、特异性高、不容易出现假阳性以及灵敏度高的一种鼻咽癌microRNA的检测试剂盒，成为了本领域技术人员亟待解决的问题。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了一种鼻咽癌microRNA的检测试剂盒，所述检测试剂盒具有稳定性好、重复性好、特异性高、不容易出现假阳性以及灵敏度高的优点。

本发明提供了一种探针组合物，所述探针组合物包括：与靶标microRNA结合的捕获探针以及信号放大组合物，所述靶标microRNA选自hsa-miR-17-5p、hsa-miR-20a-5p、hsa-miR-29c-3p、hsa-miR-223-3p、hsa-miR-34b-3p、hsa-miR-34c-5p、hsa-miR-212-3p、hsa-miR-216a-5p、hsa-miR-217、hsa-miR-151a-3p以及hsa-miR-192-5p中的一种或多种。