[发明专利]一种发酵煤渣专用的微生物菌剂及其制备方法

说明书

技术邻域

本发明属于农业厩肥处理领域，具体涉及一种发酵煤渣专业的微生物菌剂及其制备方法。

背景技术

煤渣是固体废物中的一种，其产生量大，1吨煤燃烧后平均产生约0.3吨左右的煤渣。煤渣一直被认为是一废渣。煤炭燃烧后产生的煤研石、粉煤灰是国内年排放量和累计堆放量最大的工业废弃物，每年排放的粉煤灰超过1亿t，居世界第三，这些废弃物占用大量土地，污染人类生存环境，经雨水冲测大量地流人河道，使河道雍塞，狭窄，是河道污染的主要物质之一。在多风的季节到处飘移，造成空气环境污染，影响人类健康。煤渣的化学成分主要有SiO₂、SO₃、P₂O₅、TiO₂、K₂O、Na₂O、Fe₂O₃、Al₂O₃、CaO、MgO，MnO₂等，因其含有植物生长所需的大量微量元素。目前已广泛应用于农业厩肥处理领域，在作物生产方面以及改善土壤土质方面起到了积极的作用。

期刊《农业机械学报》第43卷第1期，第115-121页，王亮等人在牛粪好氧发酵规模化生产参数优化文献中提供了一种牛粪与煤渣结合发酵时的微生物发酵菌剂，菌剂PC主要由波茨坦短芽孢杆菌、卷枝毛霉菌和钋青霉菌按照1：1：1的比例混合均匀，制成试验所需复合菌剂，但是并不能单独有效地应用于煤渣的发酵。

发明内容

本发明的目的在于能够使煤渣单独有效地发酵分解，提供一种发酵煤渣专用的微生物菌剂及其制备方法，所制备的发酵产物可以直接适用于土壤中也可以配合其他肥料混合使用。

为实现上述目的，本发明操作方法具体如下：

1)煤渣预处理，先将煤渣与膨润土或膨润粘土按比例混合，混合后土壤湿度为55-60％，覆上塑料薄膜，在30-60℃下，腐熟30-40天。

2)稀释煤渣样品，称取10g或10ml步骤(1)所得样品，加入90ml无菌水，振荡1h,形成悬独液；取1ml液体加入装有9ml无菌水试管中振荡稀释，10倍系列稀释至10²，最终稀释成10³、10⁴、10⁵、10⁶浓度梯度。

3)分离煤渣分解菌，制备LB固体、MRS固体、麦芽汁固体、高氏一号固体、PDA麸皮固体平板,分别取10³-10⁶各稀释梯度样品0.1mL,进行平板涂布，三组平行；LB固体平板倒置于37℃培养一天，高氏一号平板和PDA麸皮平板于28℃培养一周，MRS固体和麦芽汁固体平板连同厌氧罐一起置于37℃培养。从平板中挑取单菌落进行平板划线分离培养，然后将单菌落保存于相应固体斜面培养基中扩大培养，初步制得煤渣分解菌。

4)煤渣分解菌共培养，挑选LB固体、MRS固体、麦芽汁固体、高氏一号固体、PDA麸皮固体平板上划线分离培养的单菌落接种在共培养培养基进行摇瓶发酵培养，36℃，220rpm,培养36h，得到菌液。

5)煤渣分解菌剂制备，将步骤4)所得的菌液按悬液按体积百分数1-5％的接种量再次转接至共培养培养基，发酵至芽孢浓度为2-5×10¹²CFU/ml芽孢数占所述发酵菌液总菌数的80-85％以上，得到微生物菌剂。

所述步骤1)煤渣与膨润土或膨润粘土按比例混合为1-2:1-3。

所述步骤3)高氏一号平板和PDA麸皮平板含有过滤除菌的50ug/ml的氯霉素。

所述步骤4)共培养培养基组分是硫酸铵2-3g，葡萄糖3-5g，马铃薯淀粉7-8g，磷酸氢二钾0.3-0.4g,氯化钠0.2-0.4g,硫酸镁0.8-1.0g,硫酸猛0.03-0.05g,硫酸亚铁0.03-0.05g,酵母粉3-5g,蒸馏水1000ml，调节PH7.0，然后121℃，灭菌15min制备而成。

本发明具有如下优点和有益效果：

制备微生物菌剂的方法简单，得到的微生物菌剂成本低。制备的微生物菌剂在处理工业废弃物煤渣以及畜禽粪便中发酵腐熟制备有机肥中应用，得到的微生物菌剂不仅除臭效果好，能够针对性的发酵分解煤渣，并且得到的所制备的发酵产物可以直接适用于土壤中也可以配合其他肥料混合使用，将垃圾变为有机肥，对环保具有重大意义。

具体实施方式